气相色谱法测定菜籽油中BHA和BHT的前处理方法的改进
BHA和 BHT是油脂中常用的合成酚类抗氧化剂，世界各国对其限量使用有着严格的规定，我国的标准方法是 GB／T 5009．30--2003(食品中叔丁基羟基茴香醚(BHA)与 2，6一二叔丁基对甲酚(BHT)的测定》，目前，随着分析检测手段的提升，很多检验单位的气相色谱仪未配置填充柱进样口。但该方法中色谱柱不仅是填充柱，而且样品的前处理时问过长。为此，本文针对样品前处理时间较长的问题，用甲醇或乙腈提前法改进该方法的前处理，并用毛细管柱替换填充柱进行比对验证试验，方法前处理的改进和实验数据对今后检测菜籽油中 BHA和 BHT有一定的应用意义。
1 材料和方法
1．1 仪器
气相色谱仪：岛津 GC2010、带 FID检测器、自带色谱工作站；气相色谱检测条件：hp一5毛细管色谱柱(30 m×0．32 um×0．25 am)，柱温程序升温(80°C，0 min，20°C／min，230°C，10 min)，进样 口温度 200~(2、检测器温度280~(2；氮气(N )流速40 mL／min，氢气(H2)40 mL／min，空气 450 mL／min，进样体积0．5 IxL。
1．2 试剂和材料
@BHA、BHT混合标准液：准确称取 BHA、BHT各 0．1000 g混合后用二硫化碳溶解，定容至 100mL，此溶液分别为每毫升含 1．0 mg BHA、BHT，置冰箱贮藏应用时吸取原液4 mL于 100 mL容量瓶中，用二硫化碳定容至 100 mL，此容液分别为每毫升含 0．040 mg BHA、BHT，置冰箱中贮藏；②常用试剂二氯甲烷、正己烷、乙腈、甲醇和石油醚；③层析柱：1 cm x30 cm玻璃柱、带活塞，加入少量玻璃棉于层析柱底部，再加少量无水硫酸钠，然后称取 6 g硅胶和4 g弗罗里矽土(用前均于 120~C活化)，用石油醚湿法混合装柱，柱顶部再加入少量无水硫酸钠；④比色管10 mL和梨形分液漏斗 125 mL；⑤菜籽油，市售，经检测不含有 BHA、BHT。
1．3 样品前处理
样品分别用柱层析法、甲醇提取法和乙腈提取法三种方法进行前处理。
质量控制
1．3．1 柱层析法 称取混合均匀样品 1．00 g放人50 mL烧杯中，加25 mL石油醚溶解转到层析柱上，再用 10 mL石油醚分数次洗涤烧杯并转移到层析柱，用 100 mL二氯甲烷分5次淋洗 ，合并淋洗液，浓缩近干，用二硫化碳定容至 2 mL，进行气相色谱分析。
1．3．2 乙腈提取法 称取均匀样品 1．O0 g置于125 mL梨形分液漏斗中，加 5 mL正己烷溶解油样，用乙腈分 2次提取，每次 10 mL合并提取液，在旋转
蒸发器上浓缩近干，定容至 1 mL进行气相色谱分析。
1．3．3 甲醇提取法 称取均匀样品 1．00 g置于125 mL梨形分液漏斗中，用甲醇分 2次提取 ，每次10 mL合并提取液，在旋转蒸发器上挥发近干，定容止 1 mL进行气相色谱分析。
1．4 操作方法
样品分别用柱层析法、甲醇提取法和乙腈提取法三种方法进行前处理，用 1．1规定的仪器和色谱条件进行色谱分析。
2 结果和讨论
2．1 曲线线性关系和检测限测定 t将标准贮备液用二硫化碳配制成一组标准系列，其浓度为 0．02、0．04、0．06、0．08、0．10 mg／mL，进样0．5 进行气相色谱分析。用峰面积与浓度进行线性回归分析 Y =aX +b，BHA和 BHT的相关系数 r均大于0．999(见表 1)，从图 1可以看出检测成分在 6．4～7．0 min之间，能有效消除样品中其他成分的干扰，表明用 hp一5毛细管色谱柱可以达到很好的分离效果；将标准贮备液用二硫化碳配制成一个较低浓度(0．01 mg／mL)BHA、BHT混合标准液，进行气相气谱测定，连续测定 3次 ，以 3倍的噪声值作为方法的最低检测限，检测限均可达到0．5 ug。
2．2 回收率测定
将一定量的BHA、BHT混合抗氧化剂加入不含有 BHA、BHT的食用油脂 中，制成 0．05、0．1、0．2kg 3个浓度的加标样品，每个浓度取 3个平行样品，样品经三种前处理方法处理后，应用气相色谱仪分析测得平均回收率在89．5％～98％之间，回收效果良好(见表 2)。
表2 检测方法回收率试验
2．3 讨论
按照国标方法中柱层析法测定菜籽油中的 BHA和 BHT前处理过程比较复杂，而且时间较长(一般在 1—2天)，同时需要大量溶剂(100 mL石油醚，200 mL二氯甲烷)，而乙腈提取和甲醇提取法则仅
需要20 mL乙腈或甲醇，分 2次提取只需数十分钟；(见表 3三种前处理方法比较)因此我们认为乙腈提取法和甲醇提取法优于柱层析法；但乙腈的价格高于甲醇，而毒性较甲醇大，我们认为甲醇提取法更为适合。
3 结论
三种前处理方法均适用于同时测定 BHA和BHT，可以相互替代，甲醇提取法则更加快速；用hp一5毛细管色谱柱(30 m×0．32 Ixm×0．25 m)测定实验植物油中的抗氧剂 BHA、BHT，能有效消除样品中其他成分的干扰，可以达到很好的分离效果，检测时问在 10min之内。
-
焦点事件
-
焦点事件
