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结合态淀粉合成酶(GBSS)测试盒微量法

2021.9.26

结合态淀粉合成酶(GBSS)测试盒微量法
测定意义:GBSS(EC 2.4.1.21)以束缚态存在于淀粉体中,催化淀粉链的加长反应,主要负责直链淀粉的合成。

测定原理:GBSS催化ADPG与淀粉引物(葡聚糖)反应,将葡萄糖分子转移到淀粉引物上,同时生成ADP;进一步通过反应体系中添加的丙酮酸激酶、己糖激酶和6-磷酸葡萄糖脱氢酶依次催化NADP+还原为NADPH,其中NADPH生成量与前一步反应生成的ADP数量呈正比,通过340nm下测定NADPH的增加量,可以计算GBSS活性。


结合态淀粉合成酶(GBSS)测试盒微量法
需要的仪器,耗材:紫外分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

样本处理
称取约 0.1g 组织加入 1mL 提取液,冰浴中匀浆。10000g ,4℃离心 10min,弃上清,在沉淀中加入 1mL 提 取液充分混匀,置冰上待测。 




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