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菠萝蛋白酶的含量测定方法

2022.9.19

精密量取供试品溶液1.0ml,置具塞试管(15mm×130mm)中,于(37±0.5)℃水浴预热5分钟,精密加入(37±0.5)℃预热的底物溶液(取硅胶干燥器中干燥至恒重的酪蛋白0.6g,精密称定,置烧杯中,加0.05mol/L磷酸氢二钠溶液80ml,水浴中加热溶解,放冷,用1mol/L盐酸调节pH值至7.0,转移到100ml量瓶中,加水至刻度,临用新配)5.0ml,立即振摇,置(37±0.5)℃水浴中准确反应10分钟后,加三氯醋酸溶液(取三氯醋酸1.8g,无水醋酸钠2.99g,冰醋酸液1.9ml,加水使溶解并稀释至100ml)5.0ml,振摇,于(37±0.5)℃水浴中准确放置40分钟,用干燥滤纸滤过,取续滤液,在2小时内,照分光光度法(中国药典2015年版二部附录Ⅳ A),以水为空白,在275nm的波长处测定吸收度A,再精密量取供试品溶液1.0ml,加上述三氯醋酸溶液5.0ml,振摇,精密加入底物溶液5.0ml,同法操作,测定吸收度A。

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