分光光度法测定番茄内维生素c含量
1 仪器与试剂 UV-260紫外分光光度计，VitC对照品及VitC片（规格:50mg）均由河南某药厂提供，硫酸溶液（pH=6）。 2 实验操作 2.1 标准曲线的绘制 精密称取VitC对照品0.05g溶于100ml硫酸溶液，再稀释成一系列不同浓度的对照品溶液（0～14μg/ml），分别测出其吸光度。然后以浓度为横坐标，以相应的吸光度为纵坐标绘制出标准曲线。该曲线是经过原点的一条直线，可求出该曲线的斜率。 2.2 样品测定 取VitC20片，精密称定，研细，精密称出适量（相当于VitC50mg），置于100ml量瓶中，加硫酸溶液溶解并稀释至刻度，滤过，精密量取续滤液2ml置于另一100ml量瓶中，加硫酸溶液稀释至刻度，测出其吸光度A 样 。由标准曲线查出样品的浓度C 样品［3］ 。 2.3 结果计算 根据精密称出的样品的质量、溶解及稀释的体积可求出C 样 。 VitC含量=C 样品 /C 样 或VitC含量=A 样 /K×C 样 注:K为标准曲线的斜率。 3 讨论 维生素C的还原能力强而易被氧化，特别是在碱性溶液中更易被氧化。另外在碱性溶液或强酸性溶液中还能进一步发生水解。因此，选择硫酸溶液使成弱酸性。 测定时溶液pH的选择:维生素C的紫外最大吸收波长与溶液的pH值有着密切关系。在pH=2.0时，溶液的最大吸收波长在245nm;在pH=12时，溶液的最大吸收波长在300nm;在pH=5～10范围时，溶液的最大吸收波长在267nm，况且在pH=6.0时吸收度值最大。所以，选择测定溶液的pH=6.0。 本方法对仪器的要求不是很高，适用于大批量样品的定量分析。但是，若仪器搬动或重新校正波长、或者更换仪器时，标准曲线必须重新绘制。
推荐
