用圆二色光谱蛋白质与小分子作用后的构象变化实验步骤
实验步骤
1. 准备样品
准确配制7.5 μg/mg的VB12溶液、5 μg/mg牛血清白蛋白溶液、pH=4的牛血清白蛋白溶液、pH=8的牛血清白蛋白溶液、pH=4的牛血清白蛋白+ VB12溶液和pH=8的牛血清白蛋白+ VB12溶液。蛋白质溶液中加入VB12后，需要放置一段时间，使蛋白质与VB12分子作用达到平衡。
2. 开机
打开高纯氩气，通入光路。打开计算机，进入操作界面。开启氙灯，等约30 min，待仪器充分预热后，方可使用。
3. 测试
将光路径为1 cm的样品池放入样品室中，进入测试界面，输入测试参数：灵敏度1000 mdeg；扫面范围250-200 nm；扫速50 nm/min；响应时间2 s；响应波长宽度1.0 nm；扫描次数1次。先测试蒸馏水背景，再分别测试配制的六份溶液。
4. 关机
打开样品室，取出样品池；退出操作界面，关闭氙灯；关闭氮气，关闭主机电源；关闭计算机和打印机；清洗样品池。
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