D-荧光素钾盐/钠盐体内使用手册（三）
对于隐静脉注射
1. 用镇静药物（参看附录关于大鼠和小鼠麻醉剂/镇痛药物和剂量的使用）控制大鼠。
2. 拉伸后腿并把毛刮掉使隐静脉露出。
3. 对注射点进行消毒像止血一样的压力压住腿的上部。
4. 把针头插入静脉并抽吸。
5. 放开按压地方并注射。
6. 完成之后取出针头并采取适当止血。
7. 记录注射时间以确定信号达峰时间。
对于大鼠静脉注射我们建议用22-25 gauge直径大小的针头。
注意
l 注射液中确定没有气泡或泡沫，这将使小动物致死。
l 牢固而温柔地控制动物。
l 勿吸入
l 注射要慢
l 对尾部进行温水浴，这样使血管显而易见。
l 溶液将很容易流进血管，如果没有流入，重新换针头重复操作一次。
l 注射之后，用大母指短暂按压注射点来止血。
皮下注射
小鼠
皮下注射一般用于注射镇静剂或用来麻醉恢复期与溶液水合作用。皮下注射途径一般缩写为SC或SQ。溶液的注射量应被限制，不能使皮肤过度伸展（那将是不舒服的），也不能进行不必要地过度水合。一般皮下注射体积是1ml或更少。
l 最常用注射部位是颈部和肩部区域的松弛皮肤。
按常规方法控制小鼠，用指头提起皮肤像一个帐篷一样。用70%乙醇消毒注射点。建议用22 gauge 直径大小的针做皮下注射。
步骤
1. 提起背部的皮肤形成一个“帐篷”。（如果小鼠是醒着的，把小鼠放到线状盖上这样在注射过程中它能用它的前爪抓紧。）
2. 背部皮肤并撑起，用手控制住小鼠然后在露出区域注射。
3. 在皮肤撑起的根部插入针头，小心针头扎着指头。您的指头应该在撑起皮肤的顶部，针头插入点的上部是安全的。握住针头平行插入动物体内避免穿透下层组织。
4. 抽吸确保针头没有进入血管。如果位置正确应该没有吸出物。
5. 以适当的速度注射完液体。
6. 取出针头并按压皮肤来封住皮肤上的针孔防止液体流出。
7. 检查动物任何渗血现象。因为液体已经积在皮下间隙，你能看到并感觉到液体的气泡，叫疱。
8. 记录注射时间以确定信号达峰时间。
一般情况下当小鼠紧紧抓住线状盖时，它们不反对皮下注射。
大鼠
按照小鼠皮下注射方法，但按住大鼠是在桌子上而不是线状笼上。建议用23-25 gauge直径大小的针，并注射不超过5ml的液体。
l 最常用的注射位点是颈部和肩部周围的松弛皮肤。
注意
l 确保注射时针的倾斜角度很重要。
l 给大鼠注射时，用布盖在大鼠的头部防止小鼠和研究人员紧张。
l 轻轻地按注射点帮助驱散气泡。
附录
表1：推荐小鼠具体注射位点，注射体积和针头大小
途径 | 位点 | 最大体积 | 最大针头直径 |
SQ | Scruff | 1ml | 22 gauge |
IM | Caudal thigh | 0.05ml | 25 gauge |
IP | Lower ventral quadrants | 2ml | 25 gauge |
ID | Lateral abdomen/thorax | 0.05ml | 27 gauge |
IV | Lateral tail vein | 0.5ml | 27 gauge |
表2：不同给药途径和动物模型建议注射位点，针头直径大小和注射体积（出处：Harkness and Wagner’s “Biology and Medicine of Rabbits & Rodents.”）
给药途径 | 沙鼠 | 仓鼠 | 小鼠 | 大鼠 | |
IM | 位点
体积 针头直径 | Quadriceps
≤0.03ml ＜23 gauge | Quadriceps, gluteals ≤0.15ml ＜23 gauge | Quadriceps
≤0.03ml ＜23 gauge | Quadriceps, Gluteals,triceps ≤0.25ml ＜22 gauge |
IP | 位点
体积
针头直径 | Lower right quadrant of abdomen ≤2ml ＜25 gauge | Lower right quadrant of abdomen ≤3ml ＜21 gauge | Lower right quadrant of abdomen ≤2ml ＜25 gauge | Lower right quadrant of abdomen ≤5ml ＜22 gauge |
IV | 位点 体积 针头直径 | Lateral tail vein ≤0.5ml ＜23 gauge | Not recommended | Lateral tail vein ≤0.5ml ＜27 gauge | Lateral tail vein or saphenous veins ≤2ml slowly ＜22 gauge |
Intra- gastirc | 位点
体积
针头直径 | Stomach N/A 18-22 gauge 2-3cm long bulbed feeding needle | Stomach N/A 18-22 gauge 4-4.5cm long bulbed feeding needle | Stomach 5-10ml/kg 18-22 gauge 2-3cm long bulbed feeding needle | Stomach 5-10ml/kg 15-18 gauge 6-8 cm long bulbed feeding needle or 8 french flexible catheter |
SQ | 位点 体积 针头直径 | Neck, back ≤1ml ＜22 gauge | Neck, back ≤3ml ＜21 gauge | Neck, back ≤1ml ＜22 gauge | Neck, back,abdomen ≤5ml ＜21 gauge |
