D-荧光素钾盐/钠盐体内使用手册（二）
小鼠
1. 首先确定针的入口点。
2. 在膝关节的上部横跨腹部画一条想像的线。
3. 针应该沿着动物右侧这条线并贴近中间插入。（对于雌鼠，针的入口点位于最后一个乳头稍靠中间的部位。）
4. 针从小鼠的右侧插入避开盲肠，盲肠是腹部左侧一个大的充满液体的器官。小肠（位于右侧）不大可能被针刺穿。
5. 针的插入从插入点离尾部或横向太远如上显示将是危险的，可能会注射到后腿里，这样将会造成肌肉组织受伤。
6. 为完成腹腔注射，必须很好地控制好小鼠以防在操作过程中移动。一旦针插入到腹部避免器官受损伤。
7. 控制好小鼠并倾斜以便使其头向下，腹部露出来。
8. 用70%乙醇对注射位点进行彻底消毒。
9. 对于腹部注射我们建议用25-27 gauge直径的针，以30度角度插入腹部。
10. 针应插入大约半厘米（4-5mm）的深度。
11. 轻轻地吸出以确认针没有穿透血管，肠或膀胱。
a. 褐绿色吸出物表示针插进了小肠。
b. 黄色吸出物暗示针插进了膀胱。
12. 如果任何液体被吸出，表示您的溶液被污染了必须弃掉并用一个新的注射器和针头重新操作。
13. 如果没有液体被吸出，你可以开始注射。
14. 取出针头并记录下注射的时间，以确定信号达峰时间。
大鼠
按照小鼠腹腔注射操作流程。对于大鼠我们建议用一个25 gauge 直径的针头注射。
注意
l 确保针是倾斜的。
l 使动物的头倾斜向下为了使肠内物向下移动，以保持腹部四分区下部为空腔。
l 为了精确注射深度防止深层注射，我们建议放一根导管在针头上留出4-5mm为合适的深度。
l 确保注射体积，我们建议小鼠不超过2ml，大鼠不超过5ml（请参看附录关于不同动物和位点的不同注射体积。）
l 给大鼠注射时，用布盖在大鼠的头部防止小鼠和研究人员紧张。
静脉注射
小鼠
尾部静脉注射
采用化学或物理方法控制小鼠（参看附录关于大鼠和小鼠麻醉剂/镇痛药物和剂量的使用。）轻轻地旋转小鼠尾部使血管可见，用70%乙醇消毒，以轻微倾斜角度用（27-30 gauge）直径大小的针头插入血管。不能吸出，而是慢慢地注射并观察透明的内腔。不正确的位点在尾部将形成一个小的凸起。如果出现这种情况，取出针头在原来位点的附近重新操作。完成之后，取出针头并压住注射点。记录注射时间以确定信号达峰时间。
尾部静脉注射---深入介绍
尾部血管注射之前，诱导外围血管扩张是有益的，这样能使血管变得更明显。可以用白炽灯提高小鼠的体温或把小鼠尾部浸泡在温水中，或用血管舒张剂处理比如甲苯噻嗪或乙酰丙嗪。你也可以用光源照透尾部，这样将使血管易见和进入。
安全的水温是110℉或43℃，这个温度使小鼠感到稍温暖。虽然通过给麻醉小鼠加热是有益的，但应注意引起灼伤或过度加热。
尾部血管位于鼠尾部的两侧，表面上看就是皮肤下面。如果正确地把针头插入，你或许在针头接口处能看到或看不到血液闪过，你也能感觉到当针头通过皮下组织进入血管内腔时阻力很小，同时，通过注射，液体将轻易地流入血管，血管将变得透明的（由暗变亮）因为液体暂时代替了血液（像上面图片看到的那样）。
大鼠
尾部或隐静脉注射
尾部注射操作跟小鼠一样。
1. 把动物放到一个控制装置中并用水浴对尾部进行加热，注意不能使动物过热。
2. 紧紧拉直尾巴并旋转使静脉血管朝上。离手指1cm处插入针头。
3. 穿透皮肤表面后，重新调整注射器与尾巴平行，然后慢慢注射。
4 取出针头前用大母指按住注射点防止出血。
