面粉中过氧化苯甲酰紫外分光光度测定法
面粉中过氧化苯甲酰紫外分光光度测定法
摘要：本论文利用原子态氢将面粉中过氧化苯甲酰还原成苯甲酸并提取出来，采用紫外分光光度法对其进行测定。该方法的最低检出浓度为6.5mg/kg，加标回收率在89.3-97.7%之间，6次重复测定的变异系数为3.4%，与本实验室研究的气相色谱法相比对，采用t检验法对实际样品进行了分析，结果表明两方法没有显著差异。
关键词：过氧化苯甲酰；面粉；紫外分光光度法
本文为间接法测定BP，采用铁粉与盐酸反应产生的原子态氢还原BP成苯甲酸，利用紫外分光光度法测定苯甲酸的吸光度，从而推算面粉中BP的添加量。本法操作简便，乙醚用量少，易推广。
1 实验部分
1.1 主要试剂
BP标准溶液：BP易爆炸，需贮存在水中保存，用时取出，晾干，于硫酸干燥器中放置至少24h。精确称取0.1g，用丙酮溶解并定容100ml，放置冰箱保存。
1% NaHCO3/5%NaCl：用5%NaCl作溶剂，配制1% NaHCO3。
乙醚；铁粉；浓盐酸。所用试剂均为分析纯。
1.2主要仪器
紫外分光光度计（附带石英槽）、水浴振荡器
1.3操作方法
称取10g面粉于具塞三角瓶中，加入铁粉，10-20粒玻璃珠，乙醚，振摇，加入盐酸，回旋振摇，用少量乙醚冲洗瓶壁，放置过夜。振荡后沉淀倾滤，再加乙醚于三角瓶中，重复上述操作，如此洗3次。最后用少量乙醚冲洗漏斗，合并乙醚层，用NaCl水溶液洗2次，弃去水相，乙醚层用1% NaHCO3/5%NaCl溶液提取2次，提取液合并于250ml三角瓶中，加盐酸酸化，于水浴振荡器上加热振荡，冷却，用蒸馏水转移至100ml溶量瓶中，定容。于230nm测定吸光度。同时做试剂空白，以试剂空白调零。
工作曲线：移取标准溶液0.25，0.50，0.75，1.00，1.25ml，(相当于每毫升含BP2.5，5.0，7.5，10.0，12.5ug)于具塞三角瓶中，以下按“加入铁粉—”操作。
1.4计算方法
BP含量(mg/kg)=(A×V×100)/ (M×100)-K
式中： A—从工作曲线上查出的样品溶液浓度，ug/ml
V—样品溶液定容体积，ml
M—样品质量，g
K—校正值
2结果与讨论
2.1 测定波长的选择
以试剂空白调零，通过对苯甲酸、过氧化苯甲酰、样品溶液在220-260nm波长范围内扫描分析见图1，发现3种溶液均在230nm处有一尖峰，由此可确定苯甲酸在230nm处有最大吸收峰，经过处理的BP溶液和被测样品在230nm处也有最大吸收峰。因此我们选择230nm作为波长。
2.2干扰因素考察
将实验中所涉及的化合物在230nm处测其吸光度，结果见表1。
由表1可知，氯化钠不影响测定，而乙醚和氯化亚铁均干扰测定。因此在样品前处理过程中采取以下措施来减少干扰：第一，以氯化钠水溶液代替水作溶剂，这样既不干扰测定又可降低水相与乙醚相的互溶程度，同时可缓解样品处理过程中的乳化程度，有利于操作。第二，用食盐水洗去氯化亚铁。结果表明，这些措施显著地改善了样品测定的精密度和准确度。
2.3工作曲线及其精密度的测定
BP工作曲线测定见表2。由表2可知，工作曲线的相关系数为0.999，线性良好。通过4次工作曲线的测定，其斜率的变异系数为3.0%，说明工作曲线的重现性和稳定性很好。
2.4 最低检出浓度的测定
根据国际理论与应用化学家联合会(IUPAC)规定，我测定了16个全试剂空白，按3S/B计算出方法的检出限为0.65ug/ml，面粉中最低检出浓度为6.5mg/kg。面粉中允许添加量为60mg/kg，因此完全可以满足实际工作要求。
2.5 校正值(K)的初步探索
众所周知，许多物质的紫外光区均有吸收，面粉提取液中的其它有机物也会在230nm处有微弱的光吸收。通过扫描图谱可知，这些物质不会干扰苯甲酸的测定，但是会使测定值系统性的偏高。因此有必要对样品的测定结果进行校正。小麦粉的成分是随产地、品种、加工等级、加工方式等不同而有所不同，因此校正值K应是一个统计值。
2.6样品精密度和准确度的测定
通过逐级稀释法我们制备了500g中准确加入60mg/kgBP的特一粉，放置至少1周之后进行了样品精密度和准确度的测定，测定结果见表3。
由表3可知，样品测定的变异系数为3.4%(n=6)，加标回收率在89.3-97.7%之间，说明样品测定的精密度和准确度均能满足分析的要求。
2.7紫外分光光度计法与气相色谱测定样品结果比较
我们对市场上抽查的19个面粉样品采用紫外分光光度计法与气相色谱法分别进行了测定后，采用t检验法，说明两种方法之间不存在显著差异。
3结论
紫外分光光度法具有仪器价格低、乙醚用量少、测定时间短等优点。其最低检出浓度、样品测定的精密度和准确度等均能满足实际分析的要求，且与气相色普法的测定结果相比较没有显著的差异。因此该方法适宜广泛地推广使用。
参考http://www.yusnoinstru.com/，http://www.yunuo-yiqi.com/
