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即时检验(POCT)的技术原理及分类(2)

2019.4.28

二、多层涂膜技术
 
多层涂膜技术是从感光胶片制作技术移植而来。将多种反应试剂依次涂布在片基上,制成干片。采用多层涂膜技术制成的干片,比干化学纸片平整均匀,用仪器检测,可以准确定量,如目前临床使用的干板化学分析系统,可用于大多数血液化学成分,如蛋白质、糖类、脂类、酶、电解质、非蛋白氮类及一些血药浓度的监测,可供检测的项目达数十项,几乎覆盖了常做的临床生化检验项目。由于其操作简便、快速、常用于急诊检查,也相应推出了一些小型仪器,可做床边检验,但干片成本较高。
 
三、免疫层析、色谱法
 
POCT条带技术能用于测定蛋白质和酶,如心肌标志物,激素和各种蛋白质等,多为定性试验。基质中分析物的分离是通过纸层析法完成的,并且凭借固定在层析带表面的特异性抗体捕获目标分析物,用于定性分析,这种检测可通过观察颜色完成。
 
另外也有小型定量测定仪,如瑞士Roche公司的心肌标志测读仪(Cardiac Reader),可用于测定肌钙蛋白T和肌红蛋白,尚可测定D-二聚体等。Males RG等人研究发现生物化学标志物对于急性心肌梗塞(AMI)的诊断越来越重要,尤其当心电图对诊断没有帮助时。POCT技术可以在病人原位进行诊断分析,最常被医生用于帮助诊断AMI的生化标志物有肌红蛋白(Mb),CK-MB,肌钙蛋白Ⅰ(cTnI)和肌钙蛋白T(cTnT),这些都可以用POCT技术来检查,而且其性能可与实验室依据的心肌标志物相比。
 
胶体金技术也属于POCT的范畴,胶体金、银、硒及色素(包括荧光色素和非荧光色素)可以牢固吸附在抗体的表面而不影响抗体的活性,当标记抗体与抗原反应聚集到一定浓度时,可以直接呈现颜色。目前,金、银、硒及色素标记免疫反应的方法主要有斑点渗滤法和免疫层析法,用于快速检测蛋白质类和多肽类抗原,如cTnT、血清白蛋白、hs-CRP及一些病毒如HBV、HCV、HIV等的抗原和抗体定性。配合小型检测仪,可做半定量和定量。
 
目前,有些公司采用免疫层析双抗原、双抗体夹心法原理,结合胶体金标记技术相继开发了生殖内分泌、传染性疾病、性病、肿瘤标志物、毒品等类几十项,近百种规格的胶体金检测试产品。如HCG测试卡,HBV测试卡等。Shiach CR等人用POCT在实验室测定凝血酶原时间(PT)发现两组INR时间是相似的,分别为60.19%和59.13%,调查问卷显示对POCT监测病人显示很满意。
 
四、选择性电极技术
 
用离子选择性电极结合传感器包括生物传感器和化学传感器技术,制成了便携式快速检测血气(PH、PCO2、PO2等)和电解质(K+、Na+、Cl-等)的仪器,已被广泛应用于临床。

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