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β-葡聚糖的测定方法

2022.3.21

β-葡聚糖含量的测定方法,大致可归纳为如下几类:
(1)粘度法:其原理是大麦抽提液的粘度主要由β-葡聚糖产生(Burnett,1966;White等,1983)。这种方法可靠性较差,因为不同来源的β-葡聚糖的分子量不同;而在葡聚糖含量相同时,分子量较大者产生的粘度较大,这样β-葡聚糖粘性的大小并不完全取决于其含量,也取决于分子量大小(Sanlinier等,1994)。另外,抽提条件对其粘度有明显的影响。
(2)沉淀法:其原理是利用特定的盐或有机溶剂沉淀抽提液中的β-葡聚糖(Wood,1986)。该方法的局限性在于抽提不能完全排除其它物质的干扰。在高温下抽提时,抽提液中含有其它成分如淀粉等,因而干扰测定的结果。
(3)酶法:Anderson等(1978)采用特定的β-葡聚糖内切酶得到寡糖,经酸解后采用葡萄糖氧化酶/过氧化酶试剂测定葡萄糖的含量。此法后经Henry等(1988)修改为测定还原糖的含量,这样虽然精确性和可靠性有所降低,但因测定更为迅速而实用性明显提高。另外,Martin等(1981)和郑祥建等(1995)用纤维素酶测定谷物中β-葡聚糖的含量。这主要根据纤维酶不能分解微晶纤维素,而谷物中的纤维素多为微晶状,因而不至于干扰β-葡聚糖的测定结果。由于酶法不需要抽提,选用的酶为特定的,因而精确性和可靠性较高。
(4)荧光法:主要是利用荧光物质(Calcoflour)可与β-葡聚糖特异性结合,而与其它多糖如纤维素、戊聚糖的亲和力很弱这一特性进行测定。Wood等(1984)利用此法测定了燕麦的β-葡聚糖含量。Sendry等(1989)则利用改进的Calcoflour-FIA法测定了啤酒和麦芽汁的β-葡聚糖含量。由于此法操作简单,可进行大批量的样品测定,因此有较好的实际应用价值
(5)刚果红法:根据刚果红与β-葡聚糖结合具有高度专一性,将刚果红加入样品溶液中,在一定温度下准确反应一定时间后,测定其吸光度,根据β-葡聚糖标准曲线可知样品中β-葡聚糖的含量。

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