牙髓干细胞DPSCs的冻存与复苏_DPSCs的冻存
| 实验材料 | |
|---|---|
| 试剂、试剂盒 | 灭菌PBSA用冰预冷的冻存液I用冰预冷的冻存液II胰蛋白酶-EDTA溶液：0.05%胰蛋白酶0.54mmol L(0.2%)EDTA 无Ca2+和Mg2+的Hank’s平衡盐溶液溶解 |
| 仪器、耗材 | |
| 实验步骤 | (a)用PBSA洗培养瓶/皿三次。 (b)加足够的胰蛋白酶-EDTA溶液，37℃孵育。 (c)在80%的贴壁细胞从培养表面脱离时，加人MSC培养基。 (d)500g离心6min。 (e)倒掉上清，用冰上预冷的冻存液I重悬细胞。 (f)细胞计数，然后稀释或浓缩细胞到终浓度的2倍。继续将装有细胞的试管放置在冰上。 (g)在冰上边转动试管边缓慢加人等体积的冻存液II。 (h)等量按份加人冻存管。 (i)将冻存管放入程控降温仪。慢速冷冻盒和-80℃冰箱也可用于降低冷却速度。将冻存管放人液氮长期储存。 展开 |
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