如何使冻存细胞的复苏?
冻存细胞的复苏:冻存细胞较脆弱,要轻柔操作。冻存细胞要快速融化,并直接加入完全生长培养基中。若细胞对冻存剂(DMSO或甘油)敏感,离心去除冻存培养基,然后加入完全生长培养基中。
直接铺板方法
●取出贮存细胞,37℃水浴中快速融化。
●直接用完全生长培养基铺板细胞。1ml冻存细胞使用10~20ml完全生长培养基。进行活细胞计数,细胞接种应该至少在3×105活细胞/ml。
●培养细胞12到24小时,更换新鲜的完全生长培养基,去除冻存剂。离心方法
●取出贮存细胞,37℃水浴中快速融化。
●把1到2ml冻存细胞加入到大约25ml完全生长培养基,轻轻混匀。
●以大约80x g离心2到3分钟。
●弃去上清。
●在完全生长培养基轻轻再次悬浮细胞,并且进行活细胞计数。
●细胞铺板,细胞接种应该至少为3×105活细胞/ml。
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