关于黄曲霉毒素M1酶联免疫吸附法检测分析步骤介绍
（1）样品处理
牛奶样品：将50ml含脂牛奶降温至10℃以下，3500r/min离心10min，用吸管吸弃上层脂肪层，取下层牛奶液 作为待测液。奶粉样品：称取5g奶粉于100ml三角瓶中，加入50ml蒸馏水振摇5～10min混匀，以下步骤同上述牛奶样品处理方法。
（2）试剂准备
抗体：将小分子量的AFM1通过化学合成偶联一高分子量的蛋白（BSA，OV，KLH等），制备完全抗原，然后免疫家兔2～3个月，期间加强免疫3～5次，最后从家兔血液中提取抗AFM1的免疫球蛋白（即多克隆抗体）。
酶标抗原：将AFM1通过化学合成，在“桥连剂”的作用下结合上酶蛋白（常用辣根过氧化物酶），经提纯后冷冻干燥得到AFM1酶结合物。
（3）检测
将抗AFM1抗体包被于微孔板上，4 ℃过夜，封闭；每孔中加入AFM1标准溶液或样品待测液，然后加入AFM1酶结合物，37℃反应30min；洗板后每孔中加入酶基质和显色剂，37℃显色15min；目视法或仪器法测定；通过绘制标准曲线计算样品中AFM1的含量。
推荐
