青霉素钾的检查方法
吸光度取本品,精密称定,加水溶解并定量稀释制成每1ml中含1.88mg的溶液,照紫外-可见分光光度法(通则0401)测定,在280nm与325nm的波长处,吸光度均不得大于0.10;在264nm的波长处有最大吸收,吸光度应为0.80~0.88。有关物质照高效液相色谱法(通则0512)测定。临用新制。供试品溶液取本品适量,加水溶解并定量稀释制成每lml中约含4mg的溶液。对照溶液精密量取供试品溶液1ml,置100ml量瓶中,用水稀释至刻度,摇匀。系统适用性溶液取青霉素系统适用性对照品适量,加水溶解并稀释制成每1ml中约含4mg的溶液灵敏度溶液精密量取对照溶液适量,用水定量稀释制成每1ml中约含1.0g的溶液。色谱条件用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以磷酸盐缓冲液(取磷酸二氢钾10.6g,加水至1000ml,用磷酸调节pH值至3.4)-甲醇(72:14)为流动相A,乙腈为流动相B,先以流动相A-流动相B(86.5:13.5)等度洗脱,待杂质E的第3个色谱峰(见参考图谱)洗脱完毕后,立即按下表进行线性梯度洗脱;检测波长为225nm;流速为每分钟1.0ml;柱温为34℃;进样体积为20p时间(分钟)流动相A(%)流动相B(%)86.513.586.564ta+39tg+5086.513.5tg:青霉素系统适用性对照品溶液中杂质E的第3个色谱峰的保留时间系统适用性要求系统适用性溶液色谱图应与标准图谱致;灵敏度溶液色谱图中,主成分色谱峰峰高的信噪比应大于10测定法精密量取供试品溶液和对照溶液,分别注入液相色谱仪,记录色谱图。限度供试品溶液色谱图中如有杂质峰,各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积(1.0%),小于灵敏度溶液主峰面积的峰忽略不计。青霉素聚合物照分子排阻色谱法(通则0514)测定。临用新制。供试品溶液取本品约0.4g,精密称定,置10ml量瓶中,加水适量使溶解后,用水稀释至刻度,摇匀。对照溶液取青霉素对照品适量,精密称定,加水溶解并定量稀释制成每1ml中约含0.1mg的溶液系统适用性溶液(1)取蓝色葡聚糖2000适量,加水溶解并稀释制成每1ml中约含0.1mg的溶液系统适用性溶液(2)取青霉素钾约0.4g,置10ml量瓶中,加0.05mg/ml的蓝色葡聚糖2000溶液溶解并稀释至刻度,摇匀。色谱条件用葡聚糖凝胶G10(40~120m)为填充剂玻璃柱内径为1.0~1.4cm,柱长为30~40cm;以pH7.0的0.1mol/L磷酸盐缓冲液[0.lmol/L磷酸氢二钠溶液-0.1mol/L磷酸二氢钠溶液(61:39)为流动相A,以水为流动相B;流速为每分钟1.5ml;检测波长为254nm;进样体积为100~2001系统适用性要求系统适用性溶液(1)分别在以流动相A与流动相B为流动相记录的色谱图中,按蓝色葡聚糖2000峰计算,理论板数均不低于400,拖尾因子均应小于2.0,蓝色葡聚糖2000的保留时间的比值应在0.93~1.07之间。系统适用性溶液(2)在以流动相A为流动相记录的色谱图中,高聚体的峰高与单体和高聚体之间的谷高比应大于2.0。对照溶液色谱图中主峰与供试品溶液色谱图中聚合物峰,与相应色谱系统中蓝色葡聚糖2000峰的保留时间 的比值均应在0.93~1.07之间。以流动相B为流动相,精密量取对照溶液连续进样5次,峰面积的相对标准偏差应不大于5.0%测定法以流动相A为流动相,精密量取供试品溶液,注入液相色谱仪,记录色谱图;以流动相B为流动相,精密量取对照溶液,注入液相色谱仪,记录色谱图。限度按外标法以青霉素峰面积计算,青霉素聚合物的量不得过0.08%。可见异物取本品5份,每份各0.625g,加微粒检查用水溶解,依法检查(通则0904),应符合规定。(供无菌分装用)不溶性微粒取本品,加微粒检查用水制成每1ml中含50mg的溶液,依法检查(通则0903),每1g样品中,含10m及10pm以上的微粒不得过6000粒,含25m及25m以上的微粒不得过600粒。(供无菌分装用)结晶性、酸碱度、溶液的澄清度与颜色、干燥失重、细菌內毒素(供注射用)与无菌(供无菌分装用)照青霉素钠项下的方法检查,均应符合规定
