青霉素钠的检查方法
结晶性取本品少许,依法检查(通则0981),应符合规定。酸碱度取本品,加水制成每1ml中含30mg的溶液,依法测定(通则0631),pH值应为5.0~7.5。溶液的澄清度与颜色取本品5份,各0.30g,分别加水5ml使溶解,溶液应澄清无色;如显浑浊,与1号浊度标准液通则0902第一法)比较,均不得更浓;如显色,与黄色或黄绿色1号标准比色液(通则0901第一法)比较,均不得更深吸光度取本品,精密称定,加水溶解并定量稀释制成每1ml中约含1.80mg的溶液,照紫外可见分光光度法(通则0401),在280nm与325nm波长处测定,吸光度均不得大于0.10;在264nm波长处有最大吸收,吸光度应为0.80~0.88。有关物质照高效液相色谱法(通则0512)测定。临用新制供试品溶液取本品适量,加水溶解并稀释制成每中约含4mg的溶液。对照溶液精密量取供试品溶液1ml,置100ml量瓶中,用水稀释至刻度,摇匀。系统适用性溶液取青霉素系统适用性对照品适量,加水溶解并稀释制成每1ml中约含4mg的溶液灵敏度溶液精密量取对照溶液适量,用水定量稀释制成每1ml中约含1.0pg的溶液色谱条件用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以磷酸盐缓冲液(取磷酸二氢钾10.6g,加水至1000m,用磷酸调节pH值至3.4)-甲醇(72:14)为流动相A,乙腈为流动相B,先以流动相A流动相B(86.5:13.5)等度洗脱,待杂质E的第3个色谱峰(见参考图谱)洗脱完毕后,立即按下表进行线性梯度洗脱;检测波长为225nm;流速为每分钟1.0ml;柱温为34℃;进样体积为20l时间(分钟)流动相A(%)流动相B(%)to+286.5tg+38tg+39tg:青霉素系统适用性对照品溶液中杂质E的第3个色谱峰的保留时间系统适用性要求系统适用性溶液色谱图应与标准图谱致;灵敏度溶液色谱图中,主成分色谱峰峰高的信噪比应大于10测定法精密量取供试品溶液和对照溶液,分别注入液相色谱仪,记录色谱图。限度供试品溶液色谱图中如有杂质峰,各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积(1.0%),小于灵敏度溶液主峰面积的峰忽略不计。青霉素聚合物照分子排阻色谱法(通则0514)测定。临用新制供试品溶液取本品约0.4g,精密称定,置10m量瓶中,加水适量使溶解后,用水稀释至刻度,摇匀。对照溶液取青霉素对照品适量,精密称定,加水溶解并定量稀释制成每1ml中约含0.1mg的溶液。系统适用性溶液(1)取蓝色葡聚糖2000适量,加水溶解并稀释制成每1ml中约含0.1mg的溶液。系统适用性溶液(2)取青霉素钠约0.4g,置10ml量瓶中,加0.05mg/ml的蓝色葡聚糖2000溶液溶解并稀释至刻度,摇匀。色谱条件用葡聚糖凝胶G-10(40~120gm)为填充剂;玻璃柱内径为1.0~1.4cm,柱长为30~40cm;以H7.0的0.1mol/L磷酸盐缓冲液[0.1mol/L磷酸氢二钠溶液-0.1mol/L磷酸二氢钠溶液(61:39)]为流动相A水为流动相B;流速为每分钟1.5ml;检测波长为254nm;进样体积100~200l。 系统适用性要求系统适用性溶液(1)分别在以流动相A与流动相B为流动相记录的色谱图中,按蓝色葡聚糖2000峰计算,理论板数均不低于400,拖尾因子均应小于2.0,蓝色葡聚糖2000的保留时间的比值应在0.93~1.07之间。系统适用性溶液(2)在以流动相A为流动相记录的色谱图中,高聚体的峰高与单体和高聚体之间的谷高比应大于2.0。对照溶液色谱图中主峰与供试品溶液色谱图中聚合物峰,与相应色谱系统中蓝色葡聚糖2000峰的保留时间的比值均应在0.93~1.07之间。以流动相B为流动相,精密量取对照溶液连续进样5次,峰面积的相对标准偏差应不大于5.0%。测定法以流动相A为流动相,精密量取供试品溶液,注入液相色谱仪,记录色谱图;以流动相B为流动相,精密量取对照溶液,注入液相色谱仪,记录色谱图。限度按外标法以青霉素峰面积计算,青霉素聚合物的量不得过0.08%。干燥失重取本品,在105℃干燥,减失重量不得过0.5%(通则0831)。可见异物取本品5份,每份各2.4g,加微粒检查用水溶解,依法检查(通则0904),应符合规定。(供无菌分装用)不溶性微粒取本品,加微粒检查用水制成每1ml中含mg的溶液,依法检查(通则0903),每1g样品中,含10m及10pm以上的微粒不得过600粒,含25pm及25m以上的微粒不得过600粒。(供无菌分装用)细菌内毒素取本品,依法检查(通则1143),每霉素单位中含内毒素的量应小于0.10EU。(供注射用)无菌取本品,用适宜溶剂溶解,加青霉素酶灭活后或用适宜溶剂稀释后,经薄膜过滤法处理,依法检查(通则1101),应符合规定。(供无菌分装用)
