食品蛋白质测定的利器—蛋白质测定仪
目前食品中蛋白质含量的测定主要采用凯氏定氮法,但是操作烦琐,试剂用量大,耗时较长。而新型仪器蛋白质测定仪具有简单、方便、快速,试剂用量少等优点。本文使用蛋白质测定仪和电位滴定仪检测食品中的蛋白质含量,对消化条件和测定条件进行了摸索,并与凯氏定氮法进行了比对,结果报告如下：
材料与方法
1.1试剂和仪器浓硫酸、40%氢氧化钠溶液、2%硼酸溶液、5%硫酸铜溶液、10%硫酸钾酸性溶液、0.1mol/L盐酸标准溶液。B-324蒸馏装置、K-424定氮仪消化系统BUCH、电位滴定仪等。
1.2样品处理取待测固体样品0.2~1.0g或液体样品5~10ml,置消化管中;加4ml浓硫酸,10ml10%硫酸钾溶液,1ml5%硫酸铜溶液,轻轻摇匀后置于加热仪上消化。先用小火消化15min,再用强火消化45min,直至溶液澄清透明,冷却后待测。
1.3样品蒸馏将消化冷却后的样品消化液通过仪器进行蒸馏。仪器蒸馏条件为:40ml蒸馏水,20ml40%氢氧化钠,50ml2%硼酸,蒸馏时间为3min。
1.4样品滴定蒸馏液在电位滴定仪上用0.1mol/L盐酸标准溶液滴定至终点(pH=4.6)。
1.5结果计算X=(V1-V0)@C@F@0.014@100m式中:X为试样中蛋白质含量(g/100ml或g/100
g);V1为试样消耗盐酸标准滴定液的体积(ml);V0为试剂空白消耗盐酸标准滴定液的体积(ml);C为盐酸标准滴定液浓度(mol/L);F为氮换算为蛋白质的系数;m为试样的质量或体积(g或ml)。
用蛋白质测定仪检测食品中的蛋白质,简单方便快捷,结果准确可靠,避免了传统方法消化时对人体可能造成的危害和滴定时个人操作间的差异以及显色剂带来的误差。本实验操作过程中应注意下列问题:催化剂的用量不宜过多,否则会使消化液冷却后凝集成块,不利于蒸馏。若消化时加入硫酸量过多,会增加氢氧化钠的消耗量;加入过少,会导致消化不完全,因此应注意硫酸用量的适当。在配制硫酸钾溶液应充分搅拌使硫酸钾能完全溶解。
在操作实践中,要摸索比较适合本实验室的理想实验参数,并选择理想的蒸馏条件。
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