红细胞葡萄糖磷酸异构酶活性测定（荧光斑点试验）GPI
1． 原理：ＧＰＩ催化果糖－６－磷酸（Ｆ６Ｐ）转变为葡萄糖６磷酸，后者在葡萄糖６－磷酸脱氢酶催化下，转变为６磷酸葡萄糖酸。在此反应中，ＮＡＤＰ＋转变成还原型ＮＡＤＰＨ，在紫外光下，ＮＡＤＰ＋不显荧光，而ＮＡＤＰＨ则显荧光。
2． 试剂：
2.1 PH8.0Ttris-HCL.(含EDTA 5mM) 1M 100ul
2.2 Mgcl2 0.1M 100ul
2.3 D6PD (3ul) 10v/ml 100ul
2.4 NADP (0.6mg) 2mM 200ul
2.5 DW 400ul
2.6 F6P (1.29mg) 20mM 100ul
3． 操作：
取抗凝血1－2毫升用生理盐水洗涤；取压积红细胞25微升加入溶血液475微 升（1:20）中制成溶血液；吸取5微升溶血液加入100微升反应液中；37度温育30分钟后滴1滴在干滤纸上；自然干燥。在紫外线光下观察滤纸斑点的荧光。
附：溶血液配方：β－巯基乙醇0.05ml＋中性ＥＤＴＡ１０％ＰＨ７.０10ml＋水至１０００ml。
4． 结果：GPI活性正常：30分钟内出现荧光。GPI活性缺乏：超过30分钟不出现荧光。
5． 正常参考值：ＧＰＩ活性正常
6． 注意事项：每次试验需作正常对照；贫血病人取血量要相应增加。
7． 临床意义：阳性为ＧＰＩ缺乏。
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