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葡萄糖-6-磷酸脱氢酶荧光斑点试验

2021.6.09

【测定原理】
葡萄糖‐6‐磷酸(G6P)在葡萄糖‐6‐磷酸脱氢酶(G6PD)作用下形成6‐磷酸葡萄糖酸(6PGA),同时使氧化型辅酶Ⅱ(NADP)转变为还原型辅酶Ⅱ(NADPH),后者在340nm 波长紫外线照射下产生荧光。所以将含有G6P 和NADP 等的混合试剂与血混匀后,在0 分钟、5 分钟、10 分钟分别取1 滴血到滤纸上,通过观察滤纸上有无荧光及荧光出现时间可判断G6PD 活性。


【标本要求】
用EDTA(每管含20μl 1.0mg/ml EDT A)或肝素(含0.02ml 的1g/L 肝素烘干的试管)抗凝血2ml 均可。若在4℃保存,可以稳定一周,但最好是在48 小时内测定完毕。也可用肝素化末梢血。

【参考范围】
正常人0 分钟斑点无荧光,5 分钟和10 分钟斑点出现荧光,10 分钟时荧光最强。

【临床意义】
用于筛选G6PD 缺陷症患者。G6PD 缺陷症患者0 分钟、5 分钟、10 分钟荧光很弱或无荧光出现,中等缺陷者10~30 分钟内出现荧光,严重缺陷者30 分钟内不出现荧光。

【方法学评价】
该试验具有较好的特异性和敏感性,因此该方法是国际血液学标准委员会(I CSH)推荐用于筛选 G6PD 缺陷症的方法。由于该试验滤纸上干燥的血样和保存了数周的血样仍可用该试验,适合群体普查,其缺点是不能确认杂合子的状态。为了使结果更可靠,每次或每批试验时要有G6PD 活性正常和缺陷的标本作为对照。


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