M65 ® ELISA试剂盒检测CK-18在检测病患肝细胞凋亡状况中的..
M65 ® ELISA试剂盒检测CK-18在检测病患肝细胞凋亡状况中的应用
非酒精性脂肪性肝病简介
非酒精性脂肪性肝病（Nonalcoholic fatty liver disease, NAFLD）是一种与胰岛素抵抗（Insulin resistance, IR）和遗传易感密切相关的代谢应激性肝损伤，疾病谱包括非酒精性肝脂肪变、非酒精性脂肪性肝炎（Non-alcoholic steatohepatitis, NASH）、肝硬化和肝细胞癌（Hepatocellular carcinoma, HCC）。NAFLD不仅可以导致肝病残疾和死亡，还与代谢综合征（Metabolic syndrome, MetS）、２型糖尿病（Type 2 diabetes mellitus, T2DM）、动脉硬化性心血管疾病以及结直肠肿瘤等的高发密切相关。随着肥胖和MetS的流行，NAFLD已成为我国第一大慢性肝病和健康体检肝生物化学指标异常的首要原因。并且，越来越多的HBV慢性感染者合并NAFLD，严重危害人民生命健康。
《非酒精性脂肪性肝病诊疗指南》的修订
为了规范NAFLD的诊断、治疗、筛查和随访，中华医学会肝病学分会脂肪肝和酒精性肝病学组于2006年组织国内有关专家制订了《非酒精性脂肪性肝病诊疗指南》（第１版）。近８年来，国内外有关NAFLD诊疗和管理的临床研究取得了很大进展，为此，中华医学会肝病学分会脂肪肝和酒精性肝病学组联合中国医师协会脂肪性肝病专家委员会对本指南再次修订。
《非酒精性脂肪性肝病防治指南（2018更新版）》旨在帮助临床医生在NAFLD诊断、治疗、筛查和随访中做出合理决策。
角蛋白18简介
《指南》中提到的CK-18是指角蛋白18（K18, cytokeratin 18 或CK-18）。CK-18是在多种上皮细胞中高表达的胞内蛋白。大多数CK-18蛋白在胞内是不可溶性的，并在细胞死亡期间随着细胞的破裂被释放到细胞外。CK-18在细胞凋亡期间被caspase催化发生水解，为caspase所切割的片段释放到细胞外。因此细胞外的 caspase-cleaved CK-18 （ccK-18）浓度反映了细胞凋亡的数量。同时检测CK-18和ccK-18，可知道总细胞死亡中细胞凋亡的比例。
细胞凋亡与NAFLD
细胞死亡，包括坏死和凋亡。其中细胞坏死是非正常原因造成的细胞死亡。
与坏死不同，细胞凋亡是由体内外因素触发细胞内预存的死亡程序而导致的细胞主动性死亡方式，是保持肝细胞稳定的一种新陈代谢过程。但是当细胞凋亡失衡时会对肝细胞造成潜在的损伤作用。
越来越多的研究认为在NAFLD进展过程中，随着肝细胞变性、坏死增多，细胞凋亡的比例也在增加。Feldstein等对NASH患者肝活组织标本应用TUNEL方法检测肝细胞凋亡，发现凋亡明显增加，并且细胞凋亡随肝纤维化和脂肪性肝炎炎症病变程度增加而增加。在NASH中，肝细胞凋亡在由单纯性脂肪肝转变为脂肪性肝炎、肝纤维化过程中起重要作用。肝细胞凋亡不仅在脂肪肝发生肝炎反应的活动中发挥促进作用。而且也是肝纤维化过程中促发肝星状细胞活化与增殖的关键环节。肝细胞的凋亡，促进了肝损伤，直接加重了炎症反应和肝纤维化程度。
CK-18的ELISA检测方法
PEVIVA品牌的M65 ® ELISA试剂盒（产品编号：10020）以夹心法定量CK-18，一块预包被了CK-18鼠源单抗的96孔板，以HRP偶联M65抗体作为一抗，可用以评估人血清或则血浆中上皮细胞死亡情况。M30 Apoptosense® ELISA 试剂盒（产品编号10011）则特异性检测在凋亡时caspase-cleavaged CK-18在Asp396形成的新表位（又称为K18Asp396-NE 或者M30 neo-epitope），以此反映上皮细胞的凋亡情况。两种检测试剂盒的单位根据同一标准校对，可以计算caspase-cleaved和总CK-18（“M30:M65比”）。M30:M65 比值代表了细胞死亡总数中细胞凋亡细胞所占的比例。细胞凋亡导致caspase-cleaved CK-18释放，M30:M65比值较高；然而如果细胞只是发生坏死，只有CK-18的水平是升高的，所以M30:M65比值较低。
总结
目前虽然肝脏活检被认为是评估患病情况的标准方法，但是这种侵入式的技术会给患者带来创伤，且有一定风险，不适合疾病监测及相关机制的研究。《指南》及越来越多的文献支持以基于血液学的方法来对NAFLD进行研究和评估，这种方式既减少了病患痛苦，又降低了研究人员采样的难度。PEVIVA细胞死亡系列试剂盒采用血液作为样本，是检测病患肝细胞凋亡状况的非入侵式方法，是实验研究的理想选择。
| 品牌 | 产品编号 | 产品名称 | 规格 |
| Peviva | 10020 | M65 ELISA 细胞死亡M65 ELISA试剂盒 |
96 wells |
| Peviva | 10011 | M30 Apoptosense ELISA 细胞凋亡M30 ApoptosenseELISA试剂盒 |
96 wells |
