酶的特性实验—底物专一性
实验原理
酶的专一性是指一种酶只能对一种底物或一类底物（此类底物在结构上通常具有相同的化学键）起催化作用，对其他底物无催化反应。如淀粉酶只能催化淀粉水解，对蔗糖的水解并无催化作用。淀粉水解产物为葡萄糖，蔗糖水解产物为果糖及葡萄糖，这两种己糖的半缩醛基可与
Benedict试剂反应，生成氧化亚铜的砖红色沉淀。
本实验以唾液淀粉酶（内含淀粉酶及少量麦芽糖酶）和蔗糖酶对淀粉及蔗糖的催化作用，观察酶的专一性。
试剂和器材
一、试剂
2%蔗糖；1%淀粉溶液（含0.3%氯化钠）。
本乃狄（Benedict）试剂：溶解85g柠檬酸钠和50gNa2CO3•2H2O于400mL蒸馏水中；另溶 8.5g CuSO4•5H2O于50mL热水中。将硫酸铜溶液缓缓倾入柠檬酸钠－碳酸钠溶液中，边加边搅匀，如有沉淀可过滤除去，此试剂可长期保存。
二、材料
(1) 唾液淀粉酶溶液：先用蒸馏水漱口，再含10mL左右蒸馏水，轻轻漱动，约2分钟后吐出收集在烧杯中，即得清澈的唾液淀粉酶原液，根据酶活高低稀释 50-100倍，即为唾液淀粉酶溶液。
(2) 蔗糖酶溶液：取1g干酵母放入研钵中，加入少量石英砂和水研磨，加50mL蒸馏水，静置片刻，过滤即得。
三、器材
试管1.5×15cm（×10），试管架；烧杯100mL（×1），200mL（×1）；量筒 100mL（×1），10mL（×1）；玻璃漏斗；竹试管夹；水浴锅；。
操作方法
一、检查试剂
取3支试管，按下表操作：
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操作项目 |
0 |
1 |
2 |
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1%淀粉溶液(mL) |
3 |
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2%蔗糖溶液(mL) |
3 |
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蒸馏水 (mL) |
3 |
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Benedict 试剂(mL) |
2 |
2 |
2 |
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沸 水浴煮沸2-3min |
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|
记录观察结果 |
二、淀粉酶的专一性
取3 支试管，按下表操作：
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操作项目 |
1 |
2 |
3 |
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唾液淀粉酶溶液(mL) |
1 |
1 |
1 |
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1%淀粉溶液(mL) |
3 |
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2%蔗糖溶液(mL) |
3 |
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蒸馏水 (mL) |
3 |
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摇匀置37度水浴保温15min |
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Benedict 试剂(mL) |
2 |
2 |
2 |
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沸水浴煮沸2-3min |
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记录观察结果 |
三、蔗糖酶的专一性
取3 支试管，按下表操作：
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操作项目 |
1 |
2 |
3 |
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蔗糖酶溶液 (mL) |
1 |
1 |
1 |
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1%淀粉溶液(mL) |
3 |
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2%蔗糖溶液(mL) |
3 |
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蒸馏水 (mL) |
3 |
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摇匀置37度水浴保温15min |
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Benedict 试剂(mL) |
2 |
2 |
2 |
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沸水浴煮沸2-3min |
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记录观察结果 |
