阿尔茨海默病学习记忆相关行为学疑问的解答汇总（二）
Q14: 新物体识别小鼠探索物体的总时间15s左右需要剔除吗？观察时间5min？
A: 有很多实验就是设置的15s探索时间，只要标准统一，15s也是常用的参数。观察时间上限我们一般设置为5分钟，5分钟和10分钟都是主流时间，不过个人觉得5分钟就够了，不喜欢探索的小鼠即便你多等5分钟也意义不大。
Q15: 条恐freezing%阈值的选择 ，及结果的分析？
A: FC是集成度最高的设备，不同的设备对应不同的软件，很多FC设备都是自带软件的，所以Freezing的阈值设置也有所区别，一般都是有一个移动的范围和持续时间作为判断是否僵直的参考（比如小鼠在间隔为100ms的采样频率下，连续2s每帧画面的移动范围不超过5%），但是又需要通过一些算法过滤掉呼吸引起的动作，所以一般需要参考不同软件的说明进行设置。
Q16: 同一批小鼠可以把行为学都做了吗？
A: 可以，但是不同的行为学之间最好间隔两周以上，同时电刺激相关会让小鼠产生应激性的实验应该尽量放在行为实验的最后进行，NORT一般可以做2次，我们实验室以前一般是在8-9月龄时做一次NORT，18-22月龄时再做一次。
Q17: App Ps1两转鼠Aβ和Tua出现的时间？
A: 前者6-7个月出现，没有tau形成的NTF。
Q18: 恐惧箱的声音刺激55Hz够吗？箱体风扇的白噪音都有60Hz以上？
A: 我在课程里讲的是引用了2014年JOVE文章中的设置。重点是作为Cue的声音强度要和作为背景的声音强度有明显区别，强度单位是db，声音频率的单位是Hz，这两个意义不一样哦。
Q19: ymate需要对每个臂标记下吗？
A: 需要，因为严格的Y迷宫实验中每个臂都要轮换着用，所以需要标记以确保每个臂都会用到。
Q20: Y迷宫可以用人工分析吗？
A: 可以，Y迷宫相对其他行为学而言因为只有次数和时间，可以人工分析，但一定要录视频。
Q21: 可以在同一天做Y迷宫跟旷场实验吗？
A: 没有足够的证据说明不能，但是一般原则是不同行为学实验最好不要在一天做。我个人的理解是如果Y迷宫不是禁食的那种，且两个实验加起来8小时内就能完成，没问题，如果需要超过12个小时，时间跨度太大，对小鼠的节律有影响。
Q22: 新物体识别，分析怎么取数据？
A: 具体可参考课件P22。
Q23: 新物体识别怎么分析，都自己手动计时？
A: 能用软件就用视频分析软件吧，手动计时主观性太高，严格来说，手动计时需要双盲。
Q24: 水迷宫是不是需要做路径分析？
A: 是的，虽然会多花一些时间，但路径分析的意义在于即便小鼠在找到平台的用时方面没有区别，但如果路径有区别也是能说明问题的，给自己多留条路比较好，而且Reviewer也经常会问的。
Q25: 水迷宫水温的影响？
A: 水温高，驱动力不够，小鼠可能选择漂浮；水温低小鼠热量丧失快，应激反应强，容易病或死。但是对于年老小鼠（16个月以上）需要参考其他文献中的水温设定稍微提高一点。
Q26: 请问上午下午做实验有区别吗？
A: 有区别，但是要看什么实验，刺激越强的实验区别越小。实验尽量在8小时内完成，小鼠太多最好分批做，接近小鼠休息的时期或者小鼠刚休息完就进行实验小鼠状态的均一性较差（想想你自己上午和下午状态是不是一致的）。
