应用分享︱采用TSKgel G6000PWXL凝胶色谱柱高效分离检测牛奶外泌体
概述>>
外泌体(Exosomes)是一种活细胞产生的直径为40~150 nm微小囊泡,通过携带的蛋白质、脂类、RNA等参与细胞间的信息交流和物质交换。大量研究证实,外泌体对疾病治疗具有决定性帮助,特别是在疾病早期诊断和作为药物载体进行靶向治疗方面拥有广阔的应用前景。牛奶外泌体是由乳腺中多种类型细胞分泌囊泡型纳米颗粒。作为一种食物来源的颗粒,牛奶外泌体是药物递送与消化道疾病治疗的理想载体。
本应用介绍了通过SEC-HPLC对牛奶外泌体进行高效分离检测的方法。
牛奶外泌体参考方法[1]制备。
色谱柱:TSKgel G6000PWXL (7.8 mm I.D.×30 cm, 8 μm)
流动相:1×PBS(pH 7.4)
流速:1.0 mL/min
进样体积:100 μL
牛奶外泌体的SEC-HPLC色谱图
结果与讨论>>
在本应用中,作者采用凝胶色谱柱TSKgel G6000PWXL检测不同批次牛奶提取外泌体,均呈单一均质峰。通过SEC-HPLC检测聚氧化乙烯标准品,并根据各标品的尺寸和保留时间拟合标准曲线推算,牛奶外泌体保留时间约为8 min,粒径在100 nm左右。
参考文献:
1. 杨晶 等/ 规模化制备高纯度牛奶外泌体工艺方法的建立及分子与细胞生物学活性鉴定,吉林大学学报,2021,47(3):777-787.
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