【实验直击】磁微粒化学发光法检测BeaverBeads®在促甲状腺素检测试剂盒中的应用
TSH检测的临床意义:促甲状腺激素(thyrotropin, thyroid stimulating hormone, TSH)是垂体前叶分泌的糖蛋白激素,能促进甲状腺素的合成和分泌,而TSH又受下丘脑所产生的“促甲状腺激素释放激素(TRH)”的调节。当血液中甲状腺激素(T3、T4)过高时,通过负反馈调节,可抑制垂体TSH的分泌释放。因此在原发性甲减时,由于T3、T4减少,负反馈调节TSH反应性增高。垂体TSH测定不仅是目前诊断甲状腺功能减低的最敏感指标,而且有助于甲状腺性和下丘脑-垂体性甲状腺功能减低的鉴别,亦可作为甲状腺激素替代治疗调整剂量的检测手段。
TSH含211个氨基酸,糖类约占整个分子的15%。整个分子由两条肽链——α链和β链组成,分子量为28000D。目前TSH主要的测定方法有放射免疫测定法和化学发光免疫分析法。放射免疫测定法成本较低、操作也较化学发光免疫分析法简单,但是,试剂有放射性危害和环境污染等缺点。化学发光免疫法检测具有操作简单,灵敏度高等优点,并且随着生物技术的发展,化学发光免疫分析试剂和仪器价格昂贵这一缺点也在改善。
[实验直击]促甲状腺素检测试剂盒
(磁微粒化学发光法)
检测海狸免疫磁珠在促甲状腺检测试剂盒中的应用
仪器:全自动化学发光免疫分析仪 SMART 500S
试剂:促甲状腺素检测试剂盒(磁微粒发光法)、清洗液和A、B液、保养维护液、光检液、校准品S0、磁珠稀释液
耗材:反应杯
1 梯度浓度验证结果
表1 梯度浓度测试结果(注:A:试剂盒中进口磁珠;B:BeaverBeads)
TSH | A | B | B/A |
S0 | 485.30 | 235.30 | 48.49% |
S1 | 21833.70 | 25780.30 | 118.08% |
S2 | 45550.30 | 50263.70 | 110.35% |
S3 | 224334.30 | 248021.00 | 110.56% |
S4 | 453856.00 | 516108.30 | 113.72% |
S5 | 4155559.30 | 4637542.30 | 111.60% |
在TSH检测试剂盒中, BeaverBeads®的化学发光信号与试剂盒中磁珠基本保持一致,信号值稍偏高,整体偏差控制在15%以内。
2 磁珠重复稳定性性验证
表2. 重复性检测结果(注:A:试剂盒中进口磁珠;B:BeaverBeads)
A | B | |||
TSH | 低值 | 高值 | 低值 | 高值 |
1 | 21235 | 389438 | 23986 | 445613 |
2 | 19909 | 395289 | 21599 | 416672 |
3 | 20344 | 382770 | 23315 | 431681 |
4 | 20663 | 372674 | 24160 | 445812 |
5 | 20116 | 380480 | 23412 | 459975 |
6 | 20889 | 388004 | 23317 | 436594 |
7 | 21435 | 380919 | 23260 | 441463 |
8 | 20378 | 367668 | 22582 | 437604 |
9 | 20425 | 384537 | 24089 | 445911 |
10 | 22244 | 389795 | 24272 | 467071 |
CV | 3.40% | 2.16% | 3.52% | 3.18% |
产品名称 | 货号 | 规格型号 |
链霉亲和素磁珠 | 22308 | 10 mg/mL, 300nm |
SA300nm磁珠电镜图
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