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宝藏新品：NovaFluor流式荧光染料

赛默飞生命科学

2022.11.24

赛沃同学在流式配色和荧光染料上有了新思考，让我们一起来看看吧！

嗨，我看到很多小伙伴在做流式配色。你知道在做这么多配色方案时，关于荧光染料有什么需要注意的呢？同学们是这样跟我说的：

Spectral overlap, 注意荧光染料之间的光谱重叠；
Spillover spreading, 光谱重叠造成荧光溢漏，补偿太大影响数据准确性；
Antigen density, 了解抗原表达强度，合理搭配荧光染料；
Stain index, 关注染色指数：选择合适亮度的荧光染料，并使其染色指数达到最佳。

是哦。如果你自己可以设计一个荧光染料，那会是什么样呢？这又会在流式配色上有怎么变化呢？

天马行空地想，如果能设计荧光染料，希望能够像下面这几点：

不再头疼比如PE的串联染料那样多激光激发问题，最好是单个激光激发就好了；
也不用烦恼怎么调都调不好的补偿调节，期望光谱重叠越少越好；
抗原靶标有不同表达强度；如果同样荧光染料，能够有不同亮度可以选择那就好了；
最后，荧光素稳定性要好，不易淬灭，实验结果可发表、可重复的！

现在，您和赛沃娃娃的期望变成了现实，

赛默飞NovaFluor流式荧光染料来啦！

23种NovaFluor荧光染料，

700多种NovaFluor流式抗体！

2020年，赛默飞世尔科技宣布完成对Phitonex, Inc. 的收购。Phitonex, Inc. 位于美国北卡罗来纳州，研发出前沿光谱流式染料——NovaFluor™流式荧光染料，应用于细胞治疗、肿瘤免疫以及免疫学研究中。在Phitonex产品整合后，赛默飞流式整体解决方案为您提供更加出色的流式细胞分析能力，可应用于细胞治疗、肿瘤免疫以及免疫学研究中，在单个细胞中得到更多观点与发现，加速科学研究的进步。

Invitrogen™ NovaFluor™ 染料能够实现更加清晰的细胞分群，并且充分利用流式荧光通道，可以不断拓展您的高维多色实验极限。NovaFluor 流式荧光染料具有更窄的激发光谱和独特的发射光谱，而且减少激光交叉激发。通过下方链接，了解更多NovaFluor内容！现在联系赛默飞科学家，选择NovaFluor抗体，开启高维流式分析旅程！

www.thermofisher.cn/novafluor

（复制链接，在浏览器中打开）

Invitrogen™ NovaFluor™ 创新技术

NovaFluor 染料是由Phiton创新技术研发而成，通过不同的荧光基团结合到DNA纳米结构的固定位置上，获得确定高效和稳定的荧光共振能量转移(FRET)体系，从而NovaFluor荧光染料表现出更窄的激发光谱且与传统荧光染料发射光谱重叠更少。

图1. Phiton结构标签标记抗体过程。荧光基团结合到DNA单链上，然后DNA单链组成Phiton结构标签，最终Phiton结构标签以1:1与抗体偶联。

图2. 稳定的DNA纳米结构结合荧光基团，保证高效的荧光共振能量转移体系（左侧）。这使得NovaFluor减少了被多激光激发的问题且荧光溢漏更少，PE串联染料会被488nm和561nm激光器同时高效激发，而 NB610主要被488nm激发（中间）。NY610比PE串联染料溢漏更少（右侧）。

NovaFluor流式荧光染料的优势包括：

激发光谱更窄——NovaFluor的激光光谱很窄，避免由不同激光器引起的交叉激发。
发射光谱独特——NovaFluor的发射光谱独特，且在全光谱流式中溢漏更少，增加可同时使用的荧光素的种类。
亮度可选——NovaFluor创新原理允许同一荧光染料有着不同的荧光强度，如NovaFluor Blue 660/40S和NovaFluor Blue 660/120S。
荧光稳定——与串联染料相比，NovaFluor染料在固定和染色后仍然稳定，且在4℃下保存两周，荧光强度和光谱特征不变。

NovaFluor流式荧光染料选择指南

这里的荧光染料详细信息包括有荧光扩散（Spread，该荧光标记在所有非主要检测通道中的光谱荧光扩散总和计算得出）和染色指数（Stain index或亮度，使用抗人CD4-SK3对所有荧光染料检测计算得出）

*荧光扩散相对值：若值<4,000，则为Low；若值在4,000-8,000，则为Medium；若值>8,000，则为High。

NovaFluor Blue 725和NovaFluor Blue 760流式抗体将在2023年4月上市，敬请期待！

使用CellBlox 封闭缓冲液

在用Novafluor染色时推荐应用CellBlox封闭缓冲液。CellBlox封闭缓冲液的作用是封闭NovaFluor染料与单核细胞、巨噬细胞细胞染色时发生的非特异性结合，有效降低染色背景。CellBlox封闭缓冲液不是蛋白类封闭液，除了上述封闭作用之外，CellBlox还能够有效封闭花青素及其串联染料的非特异性结合，从而降低背景荧光信号。