聚合酶链式反应(PCR)是一种用于放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术,它可看作是生物体外的特殊DNA复制,PCR的最大特点是能将微量的DNA大幅扩增。 自1985年美国科学家Kary Mullis发明PCR以来的三十多年,PCR经历了三代技术的发展。第一代传统PCR技术,采用琼脂糖凝胶电泳的方法对PCR产物进行定性分析;第二代荧光定量PCR(qPCR)技术,通过在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号的积累实时监控PCR进程,最后用进入扩增指数期时的Cq值或Ct值对基因进行定量分析。第三代数字PCR(dPCR)技术,既不需要标准品,也不需要做标准曲线,即可实现对起始样本的绝对定量,并具有高的灵敏度和准确度。 新冠疫情之下,“测核酸”已成为全民热词,PCR作为测核酸的官宣仪器火爆热卖,这里更多是指荧光定量PCR(qPCR),而数字PCR在新冠检测中也开始暂露头角并表现出强大的生命力。