实验材料DNA试剂、试剂盒NaOH苯二酚(氢醌)亚硫酸氢钠石蜡油仪器、耗材离心管恒温水浴锅铝箔纸实验步骤1.将约2ugDNA于1.5mlEP管中使用DDW稀释至50ul; 2.加5.5ul新鲜配制的3M NaOH; 3. 42℃水浴30min; 水浴期间配制: 4.10mM对苯二酚(氢醌),加30ul至上述水浴后混合液中;(溶液变成淡黄色) 5. 3.6M亚硫酸氢钠(Sigma,S9000),配制方法...
实验材料DNA试剂、试剂盒NaOH苯二酚(氢醌)亚硫酸氢钠石蜡油仪器、耗材离心管恒温水浴锅铝箔纸实验步骤1.将约2ugDNA于1.5mlEP管中使用DDW稀释至50ul; 2.加5.5ul新鲜配制的3M NaOH; 3. 42℃水浴30min; 水浴期间配制: 4.10mM对苯二酚(氢醌),加30ul至上述水浴后混合液中;(溶液变成淡黄色) 5. 3.6M亚硫酸氢钠(Sigma,S9000),配制方法...
甲基化是目前的研究热点,就我所做的一点工作并其中一点心得,与大家分享。希望能够对大家有所帮助。 第一部分 基因组DNA的提取。 这一步没有悬念,完全可以购买供细胞或组织使用的DNA提取试剂盒,如果实验室条件成熟,自己配试剂提取完全可以。DNA比较稳定,只要在操作中不要使用暴力,提出的基因组DNA应该是完整的。 此步重点在于DNA的纯度,即减少或避免RNA、蛋白的污染很重要。...
在50 ul 体系中,DNA(2~5 ug)经NaOH(终浓度值0.2 mol/L)在37℃变性10 Min。 2. 对于ng级别的人基因组DNA,在进行修饰前加入2 ug蛙鱼精DNA为载体。 3. 加入30 ul 刚配制好的10 mmo/L 氢醌与520/1的40.5%亚硫酸氢钠混匀。 4. 然后用石蜡油隔绝空气的条件下,避光在50%温育16 h。 5. ...
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