ASTM D7427-08 四倍体天然橡胶及其产品衍生的四种主要过敏原蛋白（Hev b 1,3,5和6.02）的免疫测定标准检测方法
Standard Test Method for Immunological Measurement of Four Principal Allergenic Proteins (Hev b 1, 3, 5 and 6.02) in Natural Rubber and Its Products Derived from Latex
IgE 介导的对来自巴西橡胶树的天然橡胶乳胶中的蛋白质过敏原的过敏反应出现在 20 世纪 90 年代，作为偶尔过敏表现的关注点。据报道，接触天然橡胶乳胶产品的乳胶过敏者会出现荨麻疹、荨麻疹、鼻炎、哮喘和过敏反应等症状。由于橡胶树乳胶过敏原暴露的安全水平尚不清楚，因此避免是治疗乳胶过敏的主要方式。经过世界各地众多科学家的调查，迄今为止，国际免疫学会联盟 (IUIS) 过敏原命名小组委员会已鉴定出 13 种乳胶过敏原，并将其分类为 Hev b 1 至 Hev b 13（表1)（参见规范 D 1193）。由于研究人群、IgE 抗体测定方法以及分析中用作校准剂和质量控制试剂的 Hev b 过敏原质量的差异，许多报告中报告的这些过敏性 Hev b 蛋白的致敏率各不相同。然而，大多数研究都认为 Hev b 1 和 Hev b 3 对于因多次手术或长时间使用乳胶导管而通过粘膜接触而暴露的个体（例如患有脊柱裂的儿童）来说是重要的过敏原。此外，进行致敏研究的研究人员还认为，Hev b 5 和 Hev b 6.02 是重要的过敏原，可能会在接触天然橡胶乳胶的遗传易感个体中引起过敏 (2-4)。在这些临床研究的基础上，开发了这四种过敏蛋白（即 Hev b 1、Hev b 3、Hev b 5 和 Hev b 6.02）的检测方法，因此它们是本标准的主题。采用免疫酶测定试剂和标准蛋白来量化天然橡胶乳胶产品提取物中的其他乳胶过敏原（Hev b 1、3、5 和 6.02 除外）需要单独的记录和验证。从历史背景来看，已经开发了许多测定法来量化含有天然橡胶乳胶的产品中的蛋白质、抗原和过敏原的水平（参见实践 D 4483 和 D 4678）。改良的 Lowry 总蛋白测定法（测试方法 D 5712）是此类测定法中的第一个。它评估总蛋白水平，作为含乳胶产品过敏性的间接指标。该测定不区分过敏性和非过敏性蛋白质。待开发的第二种检测方法涉及在竞争性抑制免疫检测形式中使用人乳胶特异性 IgE 抗体来估计天然橡胶产品提取物的总体过敏效力 (5, 6)。将提取物与含有乳胶特异性 IgE 抗体的人血清一起孵育，然后将该混合物与固相乳胶过敏吸附剂一起孵育。乳胶过敏蛋白（如果存在）会与溶液中的乳胶特异性 IgE 抗体结合，从而抑制 IgE 抗体与乳胶过敏吸附剂的结合。然后对过敏吸附剂结合的 IgE 进行定量，并且 IgE 结合的竞争性抑制程度是乳胶过敏原的量度。虽然该测定提供了对从产品中提取的天然橡胶过敏原的过敏性或水平的估计，但由于难以获得可重复的大量含有人血清的乳胶特异性 IgE，因此阻碍了该测定的广泛使用。因此，该测定尚未作为 ASTM 标准提出。第三种测定设计类似于基于人 IgE 的竞争性抑制免疫测定，但它使用兔抗血清代替含有 IgE 抗乳胶的人血清。这