人血清蛋白质组学方法的比较和优化

摘要 目的 对人未做处理的血清以及去除白蛋白和免疫球蛋白血清的蛋白质组学方法进行比较和优化。方法 应用双向电泳一方法分离了未做处理的以及去除白蛋白和免疫球蛋白四的血清, 比较优化了高温变性、水化液成份组成及泡胀方式等影响血清一分离效果的因素, 并用质谱分析鉴定未做处理和已处理血清的一谱图中部分差异蛋白点。结果得到了分辫率和重复性较好的一谱图, 未做处理的血清、去除白蛋白及血清的平均蛋白质』点分别为士个和土个, 质谱分析了个差异蛋白点, 鉴定为种蛋白质, 其中种为功能白质。仅出现在未做处理血清中的蛋白有种, 分别是维生素结合蛋白、可溶性尿激酶血纤维蛋白溶酶原激活剂受体、蛋白激酶抗原、血清白蛋白。种蛋白仅出现在去除白蛋白和的血清中, 分别是脱氢酶辅酶亚基、肌动蛋白结合蛋白、细胞活性受体链、血小板生长因子。结论 去除高丰度蛋白可增加一些低丰度蛋白质的检出, 但非特异性吸附会导致部分功能蛋白质的丢失。