适于黄瓜叶片蛋白质组分析的双向电泳方法最佳条件的研究

摘要: 为建立适于黄瓜叶片蛋白质组分析的双向电泳方法, 对黄瓜叶片蛋白提取方法、裂解缓冲液、等电聚焦( IEF) 参数进行研究。结果表明: 丙酮法或三氯乙酸/丙酮法提取黄瓜蛋白质较好, 2- DE 图谱中蛋白点较多; 裂解缓冲液为9.5mol·L- 1 尿素, 2mol·L- 1 硫脲, 1%二硫苏糖醇(DTT), 2mmol·L- 1 三丁基磷( TBP) , 4% 3- [3- (胆酰氨丙基)二甲铵基]丙磺酸内盐(CHAPS), 0.2%两性电解质,0.002%溴酚蓝, 0.25% 吐温20, 10%异丙醇, 5%甘油, 10mmol·L- 1 苯甲基磺酰氟(PMSF)时, 电泳图谱效果最好; IEF 等电聚焦条件为25000Vh 时, 2- DE 图谱蛋白点多且清晰。