新红星苹果花芽蛋白质提取及双向电泳的改良方法

摘要: 以新红星苹果花芽为材料, 探索适合蛋白质的提取方法及其双向电泳的条件。采用物理和化学2 种方法充分裂解植物组织细胞, 并用低温操作加入PVP 等去除植物大量的酚类物质, 最后离心去除不溶性杂质的苹果蛋白质组双向电泳( 2- DE) 样品制备方法, 第1 向为ISO- DALT 等电聚焦, 第2 向为垂直平板SDS- PAGE。通过对样品制备、双向电泳参数的选择及染色等方面进行优化, 电泳图谱可分辨出蛋白质斑点数在519 个以上, 蛋白质相对分子质量约为14.0～97.0 ku, 主要分布为14.0～67.0 ku; 等电点约为3.5～9.0, 主要分布在4.0～7.0。