诱发关节炎的单克隆抗体

上一篇 / 下一篇 2009-10-12 15:45:33/ 个人分类：产品

胶原引起的关节炎（CIA）和胶原抗体引起的关节炎（CAIA）

CIA是由针对Ⅱ型胶原的自身抗体所介导的。一种相似的关节炎（图1和图2）可由抗—Ⅱ型胶原的单克隆抗体（mAb）合剂单独使用，或与LPS并用而引发。自1998年本公司开始提供可引起关节炎的单克隆抗体合剂以来，CAIA模型已被广泛采用。此种抗体合剂包含4种单克隆抗体，各自识别Ⅱ型胶原的CB11片段上不同的抗原决定簇。

重要的是，细菌毒素如脂多糖（LPS）,链球菌内毒素B（SEB），和M.arthritidis mitogen(MAM)与针对Ⅱ型胶原的自身抗体产生协同作用而引起严重的的关节炎。因此，一种“亚—致关节炎剂量”的单克隆抗体合剂与LPS的组合已广泛用于诱发小鼠高发病率而且严重的关节炎。此模型可用于多种目的，包括评估治疗效果（图3A）

CAIA的优点

1）可在24—48小时内诱发严重关节炎（图3A），而用Ⅱ型胶原免疫诱发CIA则需4个星期（图3B）。

2） CIA模型要求限定的MHC单型，而CAIA模型能在几乎所有的小鼠诱发，包括对CIA抗拒的，T—细胞有缺陷的，基因被剔除的以及基因改造的小鼠。

3）关节炎的严重性和单克隆抗体合剂的用量明显相关，增加单克隆抗体合剂的剂量可诱发更严重和恒定的关节炎。

4）本模型对研究个别基因产物，细胞因子，炎症细胞及环境因素的病理作用，以及在筛选和评估抗炎症药物(图3）方面是理想的，因它不受完全或不完全弗氏佐剂的影响，而弗氏佐剂强烈影响宿主的免疫系统。

一种新改进的5—克隆合剂

不论是否与LPS合用，为了更有效地在各类小鼠诱发关节炎，本公司已开发出一种新的单克隆抗体，加在现有的4—克隆合剂中，成为致关节炎的5—克隆合剂。其中三个克隆识别LyC1（Ⅱ型胶原124—290）片段上的决定簇，而另外二个克隆则与CB11（Ⅱ型胶原124—402）的LyC2（Ⅱ型胶原291—374）片段起反应。

请注意，致关节炎的抗原决定簇在Ⅱ型胶原分子上的分布形式不是散在的，而是随着小鼠MHC类型的不同而明显地群集在Ⅱ型胶原的某一区域内。比如DBA/1(H—2^q)小鼠是在CB11，而B10.RIII(H—2^r)小鼠则在CB8多肽上。重要的是，自身抗体与CB多肽起反应的类似局限性也见于类风湿关节炎的病人。例如，一组病人的自身抗体主要与CB11起反应，而另一组病人的自身抗体则与CB8和CB10起反应。总之，一个病人的自身抗体不能识别分布在胶原分子上的所有决定簇。

新的5—克隆合剂的致关节炎性

DBA/1小鼠：

本公司的4—克隆合剂以2 mg/小鼠的剂量iv注射并与LPS(50μg)合用能使对CIA敏感的DBA/1小鼠发生严重而恒定的关节炎（图4—红色）。而与它相对比的，同样剂量的合剂仅引起轻度关节炎，而且关节炎的严重度在个体动物间有明显差异（图4—蓝色）。新的5—克隆合剂2 mg/小鼠，比以上二种合剂引起更严重而恒定的关节炎。平均关节炎计分达到15（最高计分为20），而且维持此水平至第15天（图4—黄色）。

C.B—17/1cr小鼠

T—细胞缺陷的C.B—17/1cr小鼠亦对CAIA高度敏感。用2 mg本公司的4—克隆合剂ip注射，随后ip注射LPS（50μg）可引起严重关节炎（图5—红色）。但是一种与它相对比的同剂量合剂仅引起轻度关节炎（图5—蓝色）。而新的5—克隆合剂比以上二种合剂引起更严重而恒定的关节炎（图5—黄色），正如在DBA/小鼠所观察到的一样。

C57BL/6 小鼠

C57BL/6 小鼠需要大剂量的单克隆抗体合剂（8—10 mg/小鼠）来诱发关节炎，这提示可能C57BL/6 小鼠对LPS反映性低。用本公司4—克隆合剂引起的关节炎一般是轻度的，而且其严重性存在明显的个体差异，即使用8—10 mg/小鼠的高剂量也如此。丽日注射10 mg作对比的4—克隆合剂的小鼠产生轻度关节炎，其计分在3—8之间（图6—蓝色）。与以上二种合剂相比，新的5—克隆合剂的性能为最佳，用10 mg/小鼠注射继之ip注射LPS（50μg），可使全部小鼠发生严重关节炎（计分范围达到11—18）（图6—黄色）。