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仪器简介:恒温振荡孵育器是生命科学实验室非常常规的、必备的仪器,TMix具有振荡混合、加热、制冷等功能,宽广的温控范围、精确的温度控制、品种繁多的样品基座,满足各种实验要求。技术参数
产品特色● 提供长时间的孵育和振荡,可配合不带孵育或振荡功能的酶标仪使用● 三维孵育振荡模块消除了温度梯度和边际效应,使微孔板各孔都能均匀加热,确保实验结果的准确性和重复性● 振荡直径 1.0 mm
产品特色● 提供长时间的孵育和振荡,可配合不带孵育或振荡功能的酶标仪使用● 三维孵育振荡模块消除了温度梯度和边际效应,使微孔板各孔都能均匀加热,确保实验结果的准确性和重复性● 振荡直径 1.0 mm
产品特色 ● 提供长时间的孵育和振荡,可配合不带孵育或振荡功能的酶标仪使用 ● 三维孵育振荡模块消除了温度梯度和边际效应,使微孔板各孔都能均匀加热,确保实验结果的准确性和重复性
产品特色 ● 提供长时间的孵育和振荡,可配合不带孵育或振荡功能的酶标仪使用 ● 三维孵育振荡模块消除了温度梯度和边际效应,使微孔板各孔都能均匀加热,确保实验结果的准确性和重复性
一抗孵育温度有几种:4度、室温、37度,其中4度效果最佳;孵育时间与温度、抗体浓度有关,一般37度1-2h,4度过夜(从冰箱拿出后37度复温45min)。具体条件还要摸索。二抗一般室温或37度30min-1h,浓度一般有工作液,若是浓缩液还要摸索浓度。
1.漂洗血清蛋白H7.2-7.4 37度 PBS 2小时.2.-20度甲醇固定20分钟后,自然、干燥 10分钟3.PBS洗净:3min*34.1%Triton:25min-30min.配成50ultriton+5mlpBS5.PBS洗净
二抗孵育(Secondary antibody inucubation) 参考二抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释辣根过氧化物酶(HRP)标记的二抗。 吸尽洗涤液后,立即加入稀释好的二抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2
(1)一方面,防止切片从4度直接放入PBS易脱片; (2)另一方面,使抗原抗体结合更稳定。一般不需要,但对表达较弱的抗原可能有用,4度和37度时分子运动方式不同,前者分子碰撞机率和运动速度小于后者,后者结合更快,但敏感性也提高了
一抗孵育温度有几种:4度、室温、37度,其中4度效果最佳;孵育时间与温度、抗体浓度有关,一般37度1-2h,4度过夜(从冰箱拿出后37度复温45min)。具体条件还要摸索。二抗一般室温或37度30min-1h,浓度一般有工作液,若是浓缩液还要摸索浓度。
参考二抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释辣根过氧化物酶(HRP)标记的二抗。 吸尽洗涤液后,立即加入稀释好的二抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。回收二抗。然后加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤
一抗孵育过夜操作方法:下班时间——孵育一抗——放置在4℃冰箱内——第二天上班拿来孵育二抗时间8~10个小时,都行,
一抗孵育温度有几种:4度、室温、37度,其中4度效果最佳;孵育时间与温度、抗体浓度有关,一般37度1-2h,4度过夜(从冰箱拿出后37度复温45min)。具体条件还要摸索。二抗一般室温或37度30min-1h,浓度一般有工作液,若是浓缩液还要摸索浓度。
一抗孵育温度有几种:4度、室温、37度,其中4度效果最佳;孵育时间与温度、抗体浓度有关,一般37度1-2h,4度过夜(从冰箱拿出后37度复温45min)。具体条件还要摸索。二抗一般室温或37度30min-1h,浓度一般有工作液,若是浓缩液还要摸索浓度。
western blot 一抗孵育4小时当然有影响的,一抗孵育时间太长容易导致非特异性吸附加深一般可以室温孵育三十分,然后四度过夜。或者选择室温孵育2小时直接二抗。因为洗膜洗去的是未结合的抗体,抗体结合上就不容易洗掉了。洗膜不完全背景会深,但洗膜时间延长并不能完全去除背景。