三强破碎剂

细胞及组织破碎的方法多种多样，大致可以分为四类：一、机械破碎：1、研磨法。2、组织捣碎法。3、离心机分离法。4、超声波法。5、压榨法。6、冻融法。二、溶胀和自溶：1、溶胀：细胞膜为天然的半透膜，在低渗溶液（如低浓度的稀盐溶液）中，由于存在

　　大肠杆菌的基因工程　　一、原理：微生物 细胞在超声波的作用下，细胞结构受到破坏，而使细胞破碎。　　二、材料与试剂：超声波破碎仪、显微镜、烧杯、细胞破碎缓冲液(10mmol/L，PH7.4Tris-HCL缓冲液中含5mmol/L的

大肠杆菌表达外源蛋白，在超声破碎的时候，用含有1%triton-X-100的PBS悬浮，然后超声的效果较好，1%triton-X-100的作用还是很明显的，对其他的一些细菌同样起作用。   细菌沉淀直接加样品1buffer，再加5ul的

一、机械破碎法：是指利用捣碎机、研磨器或匀浆器 等将细胞破碎开来 。1. 高速组织捣碎：将材料配成稀糊状液，放置于筒内约1/3体积，盖紧筒盖，将调速器先拨至慢处，开动开关后，逐步加速至所需速度。此法适用于动物内脏组织、植物肉质种子等。2.

PH和适当的温度下，利用组织细胞内自身的酶系统将细胞破碎的方法。此过程需较长时间，常用少量防腐剂如甲苯、氯仿等防止细胞的污染。 2.2 酶溶法利用各种水解酶，如溶菌酶、纤维素酶、蜗牛酶、半纤维素酶、脂酶等，将细胞壁分解，使细胞内含物释放出来

德国西门子机械公司均制造各种型号的珠磨机，其破碎机下：微生物细胞悬浮液与极细的研磨剂在搅拌浆作用下充分混合，珠子之间以及珠子和细胞之间和互相剪切、碰撞，促使细胞壁破碎，释出内含物，在珠波分离器的协助下，珠子被滞留在破碎室内，浆液流出，从而

　　探头位置没放好:探头一定要接近底部，约1cm。功率根据仪器不同会有所不同，但你可以观察液面，有波动但不要太剧烈就好。　　超声破碎的条件不能一概而论，要看你的实验要求，有的是细菌破碎，有的是对组织细胞进行破碎，要掌握好功率和每次超声时间

1、高速组织捣碎机捣碎机转速可达10,000r/min，具高速转动的锋利的刀片，宜用于动物内脏组织的破碎。操作：将材料配成稀糊状液，放置于筒内约1/3体积，盖紧筒盖，将调速器先拨至最慢处，开动开关后，逐步加速至所需速度。特点：由于旋转刀片

三、化学破碎法：指利用甲醛、丙酮等有机溶剂或表面活性剂作用于细胞膜，使细胞膜的结构遭到破坏或透性发生改变 。有些动物细胞，例如肿瘤细胞可采用十二烷基磺酸钠（SDS）、去氧胆酸钠等细胞膜破坏。浓度一般为1mg/ml。四、酶学破碎法 ：选用