2021.5.21
nhs 酯反应化学
nhs 酯是通过羧酸盐分子的碳二亚胺活化形成的反应基团(参阅碳二亚胺交联剂化学)。nhs 酯活化的交联剂和标记化合物在生理至弱碱性条件下(ph 7.2 至 9)与伯胺反应,形成稳定的酰胺键。反应释放出 n-羟基琥珀酰亚胺(nhs)。
化学偶联伯胺的 nhs 酯反应方案。
r 代表具有 nhs 酯活性基团的标记试剂或交联剂的一端;p 代表含有靶官能基团(即伯胺)的蛋白质或其他分子。
nhs 酯水解与伯胺反应产生竞争。水解速率随缓冲液 ph 值的增加而增加,低浓度蛋白质溶液中的交联效率降低。在 ph 7.0 和 0°c 下,nhs-酯化合物的水解半衰期为 4 至 5 小时。在 ph 8.6 和 4°c 下,该半衰期降低至 10 分钟。在不含伯胺的水溶液中,nhs 酯水解的程度可以在 260 至 280 nm 处测量,因为 nhs 副产物在该范围内吸收峰。
nhs-酯交联反应......
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