荧光素酶互补成像lci
2019.12.19
荧光素酶（luciferase）是自然界中能够产生生物荧光的酶的总称。荧光素酶可以催化荧光素氧化成氧化荧光素，在荧光素氧化的过程中，会发出生物荧光。然后可以通过荧光测定仪测定荧光素氧化过程中释放的生物荧光。荧光素和荧光素酶这一生物发光体系，可以极其灵敏、高效地检测基因的表达，是检测转录因子与目的基因启动子区dna相互作用的一种检测方法。
目前，最有代表性的是从甲虫中分离得到的萤火虫荧光素酶（firefly luciferase）和从海肾中分离得到的海肾荧光素酶（renilla luciferase）。其中萤火虫荧光素酶作为报告基因反应目的基因表达的改变，肾荧光素酶作为内参基因，为实验提供统一基准线（减少内在变化因素如培养细胞的数目，细胞转染和裂解的效率对实验准确性的影响）。
实验原理
萤火虫荧光素酶在氧气、atp和镁离子同时存在的条件下，催化荧光素氧化，生成氧化荧光素，同时产生黄绿色光，......
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中科项目文章 | 磷酸化蛋白组学揭示植物糖稳态调控新通路
相互作用。结合这4个基因在叶片中的表达水平，结果发现GhCBL2和GhCBL1A1基因高表达，因此选择这两个基因进行进一步的研究。体内和体外实验（Pull-down实验、荧光素酶互补成像技术LCI和双分子荧光互补技术BiFC）证明GhCBL2与
BLT小课堂丨植物蛋白互作技术（二
、排列方式、量子产率、消光系数、水溶性、抗干扰能力等方面要求较高。 ② 需要更加精密的仪器，技术难度更高，操作更复杂。 荧光素酶互补法(LCI)：最初开发用于检测哺乳动物活细胞中的蛋白质-蛋白质相互作用，但后来被用于植物的研究中。借助于
荧光素酶的种类以及应用
在细胞和基因的微观世界中研究探索，遗传报告基因是非常有用的"可视化和量化"工具，具有广泛的应用。荧光素酶（萤光素酶）以出色的灵敏度、使用方便、可以定量检测而成为理想的报告基因。荧光素酶不是特定的分子，是一类中能催化产生生物发光的酶的统称
如何使用多功能酶标仪检测双荧光素酶
报告基因检测被广泛应用于研究基因表达及外部刺激下原核和真核细胞的反应。Luciferase报告基因系统是以荧光素(luciferin)为底物来检测萤火虫荧光素酶(fireflyluciferase)活性的一种报告系统。可以极其灵敏、高效地
荧光成像与生物发光成像技术的优缺点比较
简单相比生物发光成像，成像前无需注射荧光素酶底物。有合适的激发光源照射，就可发出特定波长的发射光。只要荧光基团稳定，就可实现随时激发、发光、检测。4从活体到离体均可成像相比生物发光只能在活细胞内才会发光。荧光蛋白或荧光染料只需保持荧光基团
荧光素酶报告基因检测的操作步骤
荧光素酶检测系统，可用裂解液来温和而快速地提取真核细胞中的荧光素酶，用其底物来检测荧光素酶活性。检测步骤如下：1. 加裂解缓冲液裂解转染的细胞。2. 将上述裂解物转移入微孔板或者试管中（根据检测的需要选择所用器材类型）。3. 加入含有
重组质粒的筛选（抗生素平板筛选和α互补筛选）
包括根据遗传表型筛选、限制性内切酶分析筛选、核酸探针筛选、PCR筛选等。本实验采用遗传表型筛选中的抗生素平板筛选或α互补筛选的方法。 一、抗生素平板筛选 【实验原理】 目标基因是Kan的抗性基因，而载体含Amp 的抗性基因，因此在
体内荧光成像技术的进展（三）
报道蛋白的灵敏性。另一个重要发展是β-gal体内成像中报道蛋白-酶循序技术，它极大地提高了β-gal报道蛋白的灵敏度。Blau等利用具有体内高度灵敏性的生物发光报道蛋白萤火虫荧光素酶(FLuc)，并将它同叫做d-虫荧光素-d-半乳糖苷辅剂
荧光成像与生物发光成像技术的优缺点对比
灵敏度要求相对较低，无需必配低温冷CCD，即可获得清晰成像结果。 3 实验成本低，成像过程简单 相比生物发光成像，成像前无需注射荧光素酶底物。有合适的激发光源照射，就可发出特定波长的发射光。只要荧光基团稳定，就可实现随时激发、发光
荧光素酶报告基因表达的转录调工常备用来研究培养细胞的生物学特性。荧光素酶是理想的报告基因，因为哺乳动物细胞中不含内源性荧光素酶，一旦转录完成立刻就生成功能性的荧光素酶。
荧光素酶报告基因检测一、荧光素酶报告基因检测服务介绍 荧光素酶报告基因检测是以荧光素(luciferin)为底物来检测萤火虫荧光素酶(fireflyluciferase)活性的一种报告系统。荧光素
实验项目：双荧光素酶实验 实验原理：荧光素酶报告基因系统是以荧光素(luciferin)为底物来检测荧光素酶活性的一种报告系统。荧光素酶可以催化
。将要检测的转录因子过表达质粒与报告基因质粒共转染293T细胞或其它相关的细胞系。如果该转录因子能够激活靶启动子，则萤火虫荧光素酶基因就会表达，荧光素酶的表达量与转录因子的作用强度成正比。加入特定的荧光素
