蛋白质含量测定法--2,2'-联喹啉-4,4'-二羧酸法（BCA法）
本法系依据蛋白质分子在碱性溶液中将Cu2+还原为Cu+，2,2'-联喹啉-4,4'-二羧酸（BCA）与Cu+结合形成紫色复合物，在一定范围内其颜色深浅与蛋白质浓度呈正比，以蛋白质对照品溶液作标准曲线，采用比色法测定供试品中蛋白质的含量。
本法灵敏度较高，测定范围可达80～400μg。本法测定的供试品中不能有还原剂和铜螯合物，否则干扰测定。
试剂
铜-BCA试液
取 2,2'-联喹啉-4,4'-二羧酸钠1g，无水碳酸钠2g，酒石酸钠0.16g，氢氧化钠0.4g与碳酸氢钠0.95g，加水使溶解成100ml，调节pH值至11.25，作为甲液；另取4%硫酸铜溶液作为乙液。临用前取甲液100ml，加入乙液2ml，混匀，即得。
对照品溶液的制备
除另有规定外，取血清白蛋白（牛）对照品或蛋白质含量测定国家标准品，加水溶解并制成每1ml中含0.8mg的溶液。
供试品溶液的制备
照各品种项下规定的方法制备（蛋白质浓度应与对照品溶液基本一致）。
测定法
精密量取对照品溶液0.0ml、0.1ml、0.2ml、0.3ml、0.4ml、0.5ml（对照品溶液取用量可在本法测定范围内进行适当调整），分别置具塞试管中，各加水至0.5ml，再分别加入铜-BCA试液10.0ml，立即混匀，置37℃水浴中保温30分钟，放冷，照紫外-可见分光光度法（通则0401），立即在562nm的波长处测定吸光度；同时以0号管作为空白。以对照品溶液浓度与其相对应的吸光度计算线性回归方程。另精密量取供试品溶液适量，同法测定。从线性回归方程计算供试品溶液中的蛋白质浓度，并乘以稀释倍数，即得。
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