MassARRAY系统的检测原理
MassARRAY系统基于基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱 技术(Matrix Assisted Laser Desorption /Ionization-Time of Flight, MALDI-TOF),该技术完美地整合了PCR技术的高灵敏度、芯片技术的高通量和质谱技术的高精确度,是目前唯一应用质谱直接检测SNP的技术平台。
MassARRAY 检测SNP的原理示意图
1、 PCR扩增含有目的SNP 的DNA序列,并通过纯化去除未结合的dNTPs
2、 iPLEX单碱基延伸:纯化后的PCR产物,针对每个靶点SNP设计一条延伸引物,在以ddNTPs为底物的体系中进行单碱基延伸,每个SNP的等位基因延伸产物仅为末端一个碱基的差异。
3、 纯化,并将产物转移到SpectroCHIP芯片上,进行质谱检测,同一个SNP的等位基因由于分子量不同,形成不同的检测峰而被区分。
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