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血清丙氨酸氨基转移酶同工酶的原理

2022.4.26

  在ALT速率法测定中酶偶联反应式为:

  上述偶联反应中,NADH的氧化速率与标本中酶活性呈正比,在340nm波长处,NADH呈现特征性吸收峰,而NAD则没有。因此,可在340nm监测吸光度的下降速率(-△A/min),计算出ALT的活性单位。

  (1)单试剂法:血清与(试剂成分完整的)底物溶液混合,ALT催化反应立即开始,在波长340nm,比色杯光径1.0cm,37℃经90s延滞期后连续监测吸光度下降速率。根据线性反应期吸光度下降速率(-△A/min),计算出ALT活力单位。

  (2)双试剂法:血清与(缺少α-酮戊二酸的)底物溶液混合,37℃保温5min,使样品中所含的α-酮酸(如丙酮酸)引起的副反应进行完毕。然后,加入α-酮戊二酸启动ALT的催化反应,在波长340nm处连续监测吸光度下降速率。根据线性反应期吸光度下降速率(-△A/min),计算出ALT活力单位。

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