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稳定株构建不出来怎么办?

2020.5.19

下面两种情况,常规的稳定株构建式比较困难的,但是办法总比困难多!

1)过表达:看基因功能。如果是抑制肿瘤细胞的增殖或促进肿瘤细胞的凋亡,那么是很难构建稳定株的(目的基因感染细胞后就会凋亡或不长)。

2)干扰:建议构建可诱导表达的稳定株。RNA 干扰敲减的是细胞内源在用的基因,敲减后,短时间内会看到抑制效果,但时间长了后,细胞内会有调控机制将被抑制的基因上调表达,甚至超过常规的量。

这两种情况下,建议病毒感染细胞后直接做功能实验或进行裸鼠成瘤实验。如果要做稳定株需要用TET-on慢病毒系统。


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