PCR的反应条件
PCR反应条件为温度、时间和循环次数。
1. 温度与时间的设置：基于PCR原理三步骤而设置变性-退火-延伸3个温度点。在标准反应中，双链DNA在90~95℃变性，再迅速冷却至40~60℃，引物退火并结合到靶序列上，然后快速升温至70~75℃，在 TaqDNA聚合酶的作用下，使引物链沿模板延伸。
2. PCR反应时间：变性时间一般2~3min，可以使模板DNA完全变性。复性时间一般为30~60s，足以使引物与模板之间完全结合。PCR延伸反应的时间可根据待扩增片段的长度而定，一般1kb以内的DNA片段，延伸时间1min是足够的。
3. 循环次数：循环次数决定PCR扩增程度。PCR循环次数主要取决于模板DNA的浓度。一般的循环次数选在30-40次之间，循环次数越多，非特异性产物的量亦随之增多
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