30分钟的精确定量——染料法荧光定量PCR
聚合酶链式反应,又称为PCR,是众所周知的分子生物学技术之一,可以说占据了整个分子生物学领域的半壁江山。PCR技术除了广泛应用于生命科学的基础研究外,随着近年来,以PCR为基础的分子诊断技术在临床诊断各种疾病的应用,提高了疾病的正确诊断率,给各种疾病的治疗带来了极大的便利,特别是在本次爆发的新冠病毒肺炎疫情中,更是体现了其举足轻重的作用。
大体来说,PCR实验主要包括三大主要的热循环步骤:变性、退火、延伸。对于不同的实验应用,PCR的设置可能做相应的调整,以获得一些特殊的实验结果,如产率提高,特异性增强或反应时间缩短等.
多年以来,PCR的基本原理一直未变,但随着DNA聚合酶和试剂性能的大幅提升,以及其他相关材料的不断创新,PCR实验方法也在不断改进。
我们之前对一部分PCR类型做了相关文章介绍,感兴趣的同学可以点击上方链接了解一下。今天小编为大家介绍一个PCR家族的新成员——快速PCR。首先看一下快速PCR家族第一位成员:染料法荧光定量PCR
快速染料法qPCR (SolisFAST® SolisGreen® qPCR Mix)
这款mix最大的特点是什么呢?快,快,快,既精确又快!
SolisFAST® SolisGreen® qPCR Mix是一款来自欧盟的专业PCR品牌SolisBiodyne,以其独家的蛋白质稳定ZL技术为基础,研发出极其稳定且可以快速定量的PCR Mixes,尤其是可以快速定量低浓度样本;并且其可适用于市面上多种PCR热循环仪。
该qPCR mix含有新型的硅修饰的DNA聚合酶,以及优化的快速热启动缓冲液和ZL的SolisGreen®染料 ,目前产品有两种类型:含有阳性参照染料ROX,或者不含有ROX。
优势大集锦
(一个集美貌与才华与一身的qPCR mix~·~)
2倍速定量目的基因(与标准染料法qPCR相比);
尤其适用于低浓度的样本
更灵敏的DNA染料SolisGreen® dye
更精确定量
常温运输
兼容大部分的热循环仪
30分钟跑完qPCR!
图1,对比常规qPCR mix 与SolisFAST® SolisGreen® qPCR Mix 在三种不同的PCR仪器上进行qPCR, SolisFAST® SolisGreen® qPCR Mix 可为您节约一半的时间。
精确而灵敏的基因定量
图2,3. 75 bp大小的B2M基因片段的扩增。使用SolisFAST®SolisGreen®qPCR Mix稀释人cDNA(100 ng–10 pg,每个浓度重复3次),在Mic qPCR循环仪(Bio Molecular Systems)上进行qPCR。 热循环条件:先95°C 30秒,再95°C 5秒,60°C 20秒循环。