使用流式细胞仪进行人类单核细胞亚群的全血染色
一、材料与试剂
1. 抗体
（1）鼠抗人CD56FITC（BD,340410）
（2）鼠抗人CD2FITC（BD555326）
（3）鼠抗人CD19FITC（555412）
（4）鼠抗人CD14PerCP（Invitrogen,MHCD1431）
（5）鼠抗人CD16PacBlue（BD,558122）
（6）鼠抗人HLA-DRAPC-Cy7（BioLegend,307617）
2. 其他材料
（1）带K3EDTA的玻璃全血管（BDVacutainer366450）
（2）10×BDFACS裂解液（BDPharmigen349202）
（3）20%甲醛（Tousimis1008A）
（4）PBS（CalciumandMagnesiumfree,Gibco20012-027）
（5）5 mL 聚丙烯管（BDFalcon352063）
二、仪器
1. BDLSRII流式细胞仪
三、步骤
1. 将人血加入到带K3EDTA的玻璃全血管，然后轻摇几次混合血液。
2. 将100 ul 全血加入到5 mL 的聚丙烯管，并贴上标签。
3. 取各种抗体5 uL 到血样中，轻拍管混合血样。
4. 室温，黑暗孵育样品。
5. 加入2 ml 1×BDFACS裂解液（10×Solution dilutedin ddH2O）
6. 混匀样品三次，离心2~3 min。
7. 室温，1 200 rpm 离心7 min。
8. 除去上清，用200 ul 2%甲醛重悬沉淀。
9. BDLSRII流式细胞仪检测样品。
10. 使用FlowJo分析数据。（TreeStar,Inc）
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