血片及骨髓片的制作与染色
实验原理
血涂片及骨髓片是通过特定的方法将血液或骨髓按一定方向均匀涂开的过程，微观上是使细胞由球形变为平面形或近平面形平铺在载玻片上。
瑞氏染液中酸性伊红与细胞中的碱性物质如血红蛋白、嗜酸性颗粒结合；碱性染料亚甲蓝(转变为天青B)与细胞中的酸性物质如核染色质、淋巴细胞胞浆、血小板结合。天青B和伊红结合在适宜条件下形成紫色的天青B-伊红复合物，结果使中性粒细胞的颗粒及血小板颗粒区成紫色。
实验方法
材料：
玻片、推片、瑞氏染液、磷酸盐缓冲液（pH:6.4-6.8）、显微镜。
方法：
1.消毒取血或者骨髓。
2.准备干净玻片及取边缘光滑的载片做推片。
3.取小绿豆大小的血滴或者骨髓液置于玻片的一端，将推片一端置于血滴前方，向后移动到接触血滴，使血液均匀分散在推片与载片的接触处。然后使推片与载片呈30°~40°角，向另一端平稳地推出，以一定均匀的速度向前滑动，涂片推好后，迅速在空气中摇，使之自然干燥。
4.瑞氏染色：用蜡笔在血膜两头划线，平放于染色架上；加瑞氏染液覆盖血膜，固定1min；滴加等量或稍多的缓冲液，混匀，染色5-10分钟；用清水冲洗，待干后镜检。
实验结果计算
1.一张良好的血片/骨髓片,要求厚薄适宜，头体尾分明，分布均匀，边缘整齐，两侧留有空隙。
2.染色后，PH适中则红细胞呈粉红色；PH偏碱则红细胞呈蓝色；PH偏酸则红细胞呈橘红色。
注意事项
1.玻片的清洗：新玻片常有游离碱质,因此应用清洗液或10%盐酸浸泡24h，然后再彻底清洗。用过的玻片可放入适量肥皂水或合成洗涤剂的清水中煮沸20min，再用热水将肥皂和血膜洗去，用自来水反复冲洗,必要时再置95%乙醇中浸泡1h，然后擦干或烤干备用。
2.使用玻片时只能手持玻片边缘，切勿触及玻片表面,以保持玻片清洁，干燥，中性、无油腻。
3.血滴或者骨髓液置玻片上后立即涂片，否则容易凝固，影响效果。
4.血片制好后最好立即固定染色，以免细胞溶解和发生退行性变。
5.血膜未干透，细胞尚未牢固附在玻片上，在染色过程中容易脱落，因此血膜必需充分干燥。
6.因骨髓中含骨髓小粒和脂肪，有核细胞数量较多，较血液粘稠，再推片时角度应小些，速度要慢些，推片与玻片夹角大，血膜就厚，小则薄。
7.推片速度应该适中，速度过快，涂片就会过厚，速度太慢，则太薄。
8.染色时间与染液浓度、室温及细胞多少有关，一般染液淡、染色时间长些效果好。
9.染液不能过少，以防蒸发沉淀。
10.冲洗时不能先倒掉染液，应以流水冲，防染料沉着。冲洗时间也不能长。
11.染色过淡，可复染，染色过深可用水冲洗或浸泡，还可用甲醇脱色。
12.染色时不要一次性将所有玻片染完，应留有涂片以备加做其他检查之需。
13.做骨髓涂片检查应制片至少6-10张，全部送检，，以备其他检查所用，血膜未干前不能相互叠
