血小板功能测定的临床应用价值如何之四
（1）血小板的功能可以概括为：① 黏附功能：内皮下成分、vWF（血管性血友病因子）和血小板膜糖蛋白（GP）是血小板黏附机制的个主要成分。血小板通过GPⅠb与vWF的桥联作用与内皮下组织接触黏附，进而导致血小板活化、变形并暴露GPⅡb/Ⅲa受体。
② 释放功能：血小板的主要功能是通过活化后释放的颗粒内容物实现的，多数血小板聚集诱导剂可引起释放反应。
③ 聚集功能：血小板之间互相黏附聚集成团。聚集反应分两相，Ⅰ相：损伤组织或红细胞释放的ADP导致血小板与血管壁损伤部位黏附。Ⅰ相发生迅速且可逆（可解聚）；Ⅱ相：由血小板本身释放的二磷酸腺苷（ADP）诱导。特点是缓慢且不可逆。
④ 促凝功能：血小板表面吸附的凝血因子在血小板活化时释放，参与凝血过程。另外，血小板表面磷脂也具有促凝作用。
⑤ 血块收缩功能：活化血小板在肌动蛋白细丝和肌球蛋白粗丝的相互作用下伸出伪足，收缩纤维蛋白束，使纤维蛋白网间隙的血清被挤出，血块收缩，利于伤口的缩小和愈合。
⑥ 维护血管内皮的完整性：血小板能填充受损血管内皮细胞脱落产生的间隙，参与内皮细胞的再生和修复过程。
（2）血小板功能测定方法
①
血小板聚集率，是测定血小板功能最为常用的方法，广泛用于抗血小板药物疗效的监测，比浊法和电阻法分别通过透光度和电阻抗的改变反应血小板的聚集情况。传统的血小板聚集率测定不能检测血小板微聚集体的形成，而微聚集体的形成可能和血小板高活性更加相关。Gabbasov等首次发明了使用激光散射器定量测定微聚集体的形成。
②
流式细胞仪，可以在短时间内分析大量血小板样本。最常用的活化标志物是CD62p（或称为GMP-140、P-选择素等），它在活化的血小板表面表达，是目前最具特异性的血小板活化分子标志物。但也有研究显示，CD62p的表达和动脉粥样硬化性疾病无关，这可能是由于血小板活化后CD62p从血小板表面释放入周围基质，减少了血小板上的CD62p表达。其他常用的活化标志物还有血小板表面糖蛋白Ⅱb/Ⅲa受体、血小板-白细胞结合体（PLA）等。
③
血小板功能分析系统（PFA-100），枸橼酸钠抗凝的全血样本在高切变率条件下通过膜覆盖的微孔，膜上有胶原和ADP或肾上腺素等致聚剂。血小板在致聚剂和切力的作用下形成凝血栓封闭微孔的时间称为闭塞时间（closure
time，CT）。PFA-100主要用于监测GPⅡb/Ⅲa受体拮抗剂治疗和阿司匹林抵抗的研究。研究显示，其在鉴别对阿司匹林抵抗的冠状动脉粥样硬化性心脏病患者上有很大作用。
④ 快速血小板功能分析仪（ultegra rapid platelet function
analyzer，RPFA或VerifyNow）RPFA是一种自动全血比浊度测定仪，通过纤维素原包被的微球与全血反应，检测某一时间间期内血小板聚集所致光吸收的改变。主要用于床旁评估抗血小板药物治疗的反映，方法简单、快速、准确。香港大学玛丽医院通过RPFA评估规律双联抗血小板患者中的抗血小板药物抵抗，其功能水平能预测经皮冠状动脉成形术（PCI）后患者的血栓事件。RPFA还被广泛用于阿昔单抗、替罗非班、依替八肽等GPⅡb/Ⅲa抑制剂的抗血小板疗效监测。
⑤ Cone and Plate（let）
Analyzer（CPA），这种方法在高切力场下测量血小板的黏附和聚集。少量（0.2mL）枸橼酸钠抗凝的全血在高切力下旋转，自动染色后经图像分析软件测量血小板黏附。方法简单快速，样本量少，且高剪切力条件可模拟生理环境。CPA可用于快速鉴别遗传性和获得性血小板功能障碍和血管性血友病（vWD），监测血小板治疗和测定血小板高活性状态（如糖尿病患者）。
⑥ 血栓弹力图（TEG），血栓弹力图的测定流程是在肝素化血液样本中加入巴曲酶和凝血因子ⅩⅢ形成初级血栓，再加入花生四烯酸和ADP形成血小板纤维蛋白凝块。血栓弹力图是血小板纤维蛋白凝块的最大弹力度，其结果与血小板聚集率的测定结果关联度好。
⑦
磷酸化VASP测定，VASP是一种血小板蛋白，基线时处于非磷酸化状态。磷酸化过程受cAMP级联过程调控，而前列环素E1（PGE1）能激活这个级联反应。VASP的磷酸化与P2Y12受体的抑制水平直接相关。所以，氯吡格雷等抗血小板药物的效应可以通过测定磷酸化的VASP来评价，故也可以用于评价抗血小板药物的群体差异。磷酸化VASP测定方法敏感性和特异性都较强，与血小板聚集率的测定平行性好，需要的血样样本小并可使用全血。
此外，Plateletworks及电子显微镜等也可以用于血小板功能检测。
（3）血小板功能测定方法的临床应用价值
① 在心血管疾病中的应用：A.
早期诊断血栓前状态，对血栓前状态的早期诊断可以帮助判断血小板是否处于活化状态，这也是血小板参与血栓形成的前提。B.
血小板功能测定可以预测心血管疾病的临床终点。流式细胞仪测定活化血小板的表面特异性标志物能预测急性冠状动脉综合征和支架植入后患者的主要不良心脏事件（MACE）。C.
对抗血小板药物疗效的监测，抗血小板治疗是行PCI的患者围手术期和手术后药物治疗的基石。阿司匹林和氯吡格雷双联抗血小板治疗是目前PCI后患者二级预防的常规治疗。尽管进行规律的抗血小板药物治疗，仍有部分患者会再发血栓事件。抗血小板药物不能有效防止动脉内血栓形成的现象称为抗血小板药物抵抗，可分为阿司匹林抵抗、氯吡格雷抵抗和GPⅡb/Ⅲa拮抗剂抵抗等。最近的研究则显示，血小板对抗血小板药物治疗的反应呈现对称的钟型分布，所以提出用血小板功能测定评估抗血小板治疗的反应是顺理成章；
② 在糖尿病中的应用：糖尿病本身就是支架内血栓的预测因子，可能在将来能通过测定血小板功能解决是否延长氯吡格雷的使用时间的问题；ACS合并2型糖尿病患者与非糖尿病ACS患者相比，前者纤溶系统明显异常，血小板功能亢进，提示发生心血管事件的危险性更大；
③
在尿毒症透析诊治中的应用：尿毒症透析患者晚期易出现出血情况，其原因为体内凝血系统的障碍，而血小板是体内凝血系统的主力军，其功能的好坏可以直接影响凝血体系的运转，血液聚集试验可以很好的发现血小板的聚集情况，进而判断其聚集功能，对临床医生发现尿毒症透析患者出血原因有较大的临床价值；
④ 在肝脏疾病中的应用：肝硬化患者的血小板聚集率则明显减低；
⑤ 在妊娠高血压综合征中的应用：妊高症患者的ADP诱导的血小板聚集反应明显升高，释放也有所增加。另外，胶原诱导血小板聚集在妊娠25周升高提示先兆子痫等等。
