药物杂质分析解决方案——离子阱多级液质（三）
未知杂质分析
未知杂质的鉴定是杂质研究工作中非常重要的一部分内容，因为结构未知，如何采集到准确的杂质母离子和多级质谱信息成为结构解析的前提和关键。数据关联多级质谱及动态扫描功能可以实现对未知杂质信号的采集。
如下图所示，离子阱通过一级扫描，获得化合物质谱信息，根据质谱响应强弱自动选择母离子进行多级质谱扫描，一次进样即可获得杂质多级质谱信息。
图5. 数据关联扫描同时采集已知与未知杂质
在采用数据关联扫描对洛哌丁胺药物的分析中，离子阱通过全扫获得一级质谱信号，然后对响应最强的洛哌丁胺母离子进行二级碎裂，然后自动选则m/z 266 和m/z 210 两个主要二级离子进行三级碎裂，紧接着对由二级离子m/z 266 产生的三级离子m/z 210 和m/z 238 进行四级碎裂。数据关联扫描可以在一次进样内，即自动完成多级质谱过程，无需预先知道样品中的化合物信息，提高了分析通量和数据信息量。
图6. 数据关联扫描采集洛哌丁胺多级质谱数据
动态排除功能：在药物杂质研究中，常涉及到从液相方法到液质方法的转移过程，而液质方法因为流动相与液相不同，往往无法在短时间内将所有杂质分离，离子阱具有动态排除功能，开启后可以对所有共流出杂质进行多级碎裂，以应对色谱未完全将杂质分离的情况。
在下图中，化合物m/z 452和m/z 407发生了共流出，开启动态排除后，仪器首先对响应较高的m/z 407进行二级碎裂，然后将m/z 407 放入排除列表，在下一次全扫中，响应较高的m/z 407 即作为排除项，转而选择响应较弱的m/z 452 进行二级碎裂。所以在一个色谱峰内，即使有多个化合物存在，动态排除都能保证采集到每个化合物的多级质谱信号。
图7. 动态排除采集共流出杂质组分
数据分析
杂质的种类繁多，即使是相同元素组成的化合物，结构也可能完全不同，所以需要对采集到的数据进行有效的解析，对推测的结构式进行判断，Mass FrontierTM为质谱谱图的管理、评估和解析提供精密的特性。它可广泛应用于小分子结构鉴定，应用范围涉及包括药物开发、杂质的分析和毒理研究过程中代谢产物的识别等广阔领域。
图8. Mass Frontier结构解析软件
MassFrontier 专业结构解析软件
使用Massfrontier，研究人员可以方便的从已采集的数据中获取以下信息：
● 化合物的裂解机理
因为杂质的结构和母药的结构往往类似或者具有渊源，所以了解母药的裂解规律可以帮助判断杂质的碎片结构，进一步推测出杂质的结构。
以前的方法仅仅依靠研究者的个人经验，或者纯理论的计算，使得数据分析的重现性和准确性受到了限制。
图9. 传统结构解析方法
Mass Frontier 所含有的Fragmentation LibraryTM 碎裂机理谱图库是从现存的所有关于质谱的出版物中收集而来，几乎涵盖了所有已发表的文献。每一种机理，连同其化学结构，都经过人工和自动核对，然后连同标题、作者及信息来源等附带信息一块储存于谱图库中。谱图库所收集的信息，加上通用的电离、碎裂和重组规则，为碎裂机理的预测提供了有力的保障。Mass Frontier 还可以允许用户创建基于客户自定义碎裂机理上的谱图库，并能学会并运用这些机理来智能预测碎片分子。
