乙二醛/DMSO 变性琼脂糖凝胶电泳

2019.9.12

试剂、试剂盒	10XBPTE 电泳缓冲液二甲基亚砜（DMSO) 去离子乙二醛乙一醛反府混合液上样缓冲液
仪器、耗材	水平电泳装置
实验步骤	(一）村料与设备 1)10XBPTE 电泳缓冲液：100 mmol/LPIPES，300 mmol/LTris，lOmmol/LEDTA(pH8.0) 2) 二甲基亚砜（DMSO) 3) 去离子乙二醛 4) 乙一醛反府混合液：6 mlDMSO,2 ml 去离子乙二醛,2 mL10XBPTE 电泳缓冲液，0.6 ml80% 甘油,0.2 ml 溴化乙锭（10 mg/ml) 5) 上样缓冲液:50% 甘油.10 mmol/L 磷酸钠 (PH7.0),0.25% 溴酚蓝，0.25% 二甲苯青 6) 水平电泳装置 (二）操作方法 1) 制备凝胶：用 1XBPTE 电泳缓冲液配制 1.2% 的琼脂糖凝胶 2) 电泳：向 1〜2ulRNA 样品 (总共 10ug）中加入 10ul 乙二醛反应混合液，55℃ 保温lh，冰浴 10 min, 离心，加入 1〜2ul 上样缓冲液，立即上样电泳，用 1XBPTE 作电泳缓冲液，在 60℃ 恒压下电泳，当溴酚蓝迁移至 1/2〜2/3 时，停止电泳。 3) 观察结果：在紫外灯下观察结果展开

试剂、试剂盒

10XBPTE 电泳缓冲液二甲基亚砜（DMSO) 去离子乙二醛乙一醛反府混合液上样缓冲液

仪器、耗材

水平电泳装置

实验步骤

(一）村料与设备

1)10XBPTE 电泳缓冲液：100 mmol/LPIPES，300 mmol/LTris，lOmmol/LEDTA(pH8.0)

2) 二甲基亚砜（DMSO)

3) 去离子乙二醛

4) 乙一醛反府混合液：6 mlDMSO,2 ml 去离子乙二醛,2 mL10XBPTE 电泳缓冲液，0.6 ml80% 甘油,0.2 ml 溴化乙锭（10 mg/ml)

5) 上样缓冲液:50% 甘油.10 mmol/L 磷酸钠 (PH7.0),0.25% 溴酚蓝，0.25% 二甲苯青

6) 水平电泳装置

(二）操作方法

1) 制备凝胶：用 1XBPTE 电泳缓冲液配制 1.2% 的琼脂糖凝胶

2) 电泳：向 1〜2ulRNA 样品 (总共 10ug）中加入 10ul 乙二醛反应混合液，55℃ 保温lh，冰浴 10 min, 离心，加入 1〜2ul 上样缓冲液，立即上样电泳，用 1XBPTE 作电泳缓冲液，在 60℃ 恒压下电泳，当溴酚蓝迁移至 1/2〜2/3 时，停止电泳。

3) 观察结果：在紫外灯下观察结果

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周锦帆