实验分析方法--疏水作用色谱固定相的相关介绍
疏水作用色谱(ydrophobic interaction chromatograhy,HIC)是为了适应活性生物大分子特别是蛋白质的分离而发展起来的一种液相色谱方法。分离机理与反相色谱的强疏水性作用类似,但是其分离机制更多地依赖于溶质与固定相表面之间弱的疏水性相互作用。
HIC柱固定相的表面具有弱疏水性特征,在高离子强度流动相条件下,蛋白质分子中的疏水性部分与固定相表面产生疏水性相互作用而被吸附,当流动相的离子强度逐渐降低时,蛋白样品则按其疏水性特征被依次洗脱,疏水性越强,洗脱的时间越长,进而实现分离。
与反相色谱相比,HIC方法避免了流动相中使用大量有机溶剂,能有效地保持被分离物质的生物活性,因此在生化样品的分离纯化方面被广泛采用。
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