实验分析方法--体积排阻色谱固定相的相关介绍
体积排阻色谱固定相包括具有确定孔径的有机和无机凝胶两大类,常用的凝胶包括硅胶、葡聚糖或琼脂糖凝胶、二乙烯基苯、丙烯酸酯、聚苯乙烯等。不同的凝胶在性能、使用及装柱方法等方面存在明显差异。由于聚合物固定相有轻微的交联,置于溶剂中时会产生1m的有效孔径。实际上在聚合物和硅胶固定相中,孔径有着不同的意义:硅胶固定相的孔径描的是实际可测的数据,能够通过压汞法或氮气吸附法测得;而聚合物固定相中“孔径”描述的是聚合物链长延伸时排除的空间。例如:一个指定的100m的聚合物SEC固定相近似地等效于孔径为8nm的硅胶。
改性硅胶和未改性硅胶均可作为体积排阻色谱固定相,用于非水溶剂体系进行凝胶渗透色谱(GPC)分析,或以水溶液为流动相分离水溶液高聚物。为了克服硅胶表面残余硅羟基所导致的不可逆吸附,一般通过与小分子硅烷化试剂作用,以尽可能地将表面残余的硅羟基覆盖。此外,调整流动相的性质也会改善或降低凝胶表面对溶质的非特异性吸附。例如,在亲水凝胶色谱流动相中添加中性盐(一般加0.15 mol/L NaCl)即可使残余硅羟基的离子交换影响降至可忽略的程度。
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