用高效液相色谱法检测食品中脱氢乙酸
液相色谱法
改进了GB/T 23377测定食品中脱氢乙酸的高效液相色谱标准方法。用氢氧化钠溶液提取样品中的脱氢乙酸，用高效液相色谱(HPLC)紫外检测器测定脱氢脱蛋白，并与标准系列进行了比较。
2实验部分
仪器与主要试剂
液相色谱仪：奥普斯高效液相色谱仪
脱氢乙酸的标准产物：纯度为99.6％，
甲醇：色谱纯。
醋酸铵溶液（0.02mol/L）：分析纯，称取醋酸铵1.54g用氨水（1+1）调节pH至9.0加水至1000m L溶液中，用0.45μM滤膜过滤。
色谱条件
色谱柱：C18 柱 （5μ m，250mm×4.6mm）；
流动相：甲醇0.02mol/L醋酸铵(595，v)
流速：1.0mL/min
柱温：40℃
检测波长：293nm
在上述色谱条件下，注入脱氢乙酸标准溶液：
样品处理
5×10g样品(准确至0.0001g)，加入50 ml水，用氢氧化钠溶液(8g/L)调节pH至7.2，加入5ml醋酸锌溶液(220 g/L)，5ml铁氰化钾溶液(106 g/L)，超声提取40 min，恒容100 ml，静态30 min 0.45μm滤膜进行液相色谱测定。
方法讨论
色谱条件选择
GB/T 23377-2009国家标准方法中，流动项为甲醇+0.02mol/l乙酸铵（10+90，V/V）考虑到食品中其他添加剂对脱氢乙酸(山梨酸、糖精钠等)测定的影响，甲醇-0.02mol/L醋酸铵(595，v)的流动相比国标法要好。
线性关系
在实验条件下脱氢乙酸标准工作液在0.5-100μg/ml范围内与响应值的峰面积呈良好的线性关系，相关系数r=0.99999脱氢乙酸的检测浓度为0.1,g·mL·L~(-1)·L~(-1)·L~(-1)。
准确度与精密度
按本方法测定，做加标实验，每 一浓度重复测定6 次实验结果表明，该方法回收率满意，相对标准偏差小于10%重复性好符合检测要求。
