高效液相色谱仪检测五味子醇甲、五味子甲素和乙素含量
高效液相色谱法同时测定五味子甲、乙的含量
1 范围
该方法适用于五味子中五味子A、五味子A、B的测定。
2 原理
从样品中提取木脂素后采用等度洗脱反相高效液相色谱法分离二极管阵列检测器检测色谱峰保留时间和紫外光谱定性，外标法定量该方法适用于以五味子为主要原料生产的保健食品中五味子A、五味子A、B的定量分析。
3 试剂
除另有规定外，所用试剂均为分析纯试验用水符合GB/T 6682-2008中一级水的要求。
甲醇（CH3OH）：色谱纯。
五味子醇A、五味子A、B标准：含量大于98%。
五味子甲素、五味子甲素、五味子乙素标准溶液的制备：分别制备浓度为2mg/ml的五味子甲素、五味子甲素、五味子乙素标准储备溶液，然后制备浓度范围为0.02mg/ml-1mg/ml的混合标准系列溶液；所有标准溶液均用甲醇制备。
4 仪器
高性能液相色谱仪,二极管阵列检测器或紫外检测器。
超声波清洗器
分析天平：灵敏度1毫克，0.1毫克。
5 分析步骤
样品处理：适量样品（相当于五味子30mg，精确至0.001g）放入20mL容量瓶中加入甲醇约18mL超声提取20min，取出待冷却加入甲醇至刻度样品溶液经0.45μm有机系统膜过滤滤液用高效液相色谱法分析。
测定
液相色谱参考条件
柱：C18柱，5μm，100 250 mm，4.6×柱或等效性能柱。
检测波长：254nm。
等度浸出条件：甲醇水=77:23（v/v）。
流速：1mL/min。
柱温：35℃。
色谱分析
标准曲线的制备：用10μL高效液相色谱法分析标准混合系列溶液，用峰面积对浓度计算五味子醇A、五味子A和五味子B的标准回归曲线。
样品测定：取10μl样品纯化液进行高效液相色谱分析，用绝对保留时间和紫外光谱法测定性质，用五味子甲、乙的标准曲线按峰面积定量计算样品含量。
6分析结果的表述
按公式(1)计算样品中五味子A,五味子A,五味子B的含量。
式中：X样品中五味子甲素,五味子甲素,五味子乙素的含量,mg/100g；
C样液中五味子醇A、五味子A、B的含量，mg/mL；
m试样质量，g。
计算结果用重复条件下两个独立测定结果的算术平均值表示,并保留三个有效数字。
7 精密度
在重复性条件下获得的两个独立结果的绝对差值不超过算术平均值的10%。
8 其他
该方法的检出限分别为五味子甲0.02μg,五味子甲0.03μg,五味子乙0.02μg。
该方法的线性范围为0.210μg。
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科技前沿
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企业风采
